STUDY OF MILK EXOSOMES NUCLEIC ACIDS

Abstract

Full Text

Экзосомы - нановезикулы диаметром 40-100 нм, содержащиеся в различных биологических жидкостях. Показано наличие белков, ДНК, мРНК и микроРНК в эк-зосомах. Присутствие микроРНК в экзосомах свидетельствует об их вовлеченности в межклеточную коммуникацию, что делает экзосомы перспективным объектом изучения. Экзосомы содержатся в различных биологических жидкостях. Наиболее изученными на данный момент являются экзосомы крови и различных культуральных жидкостей, в то время, как об экзосомах молока известно мало. Поскольку молоко является источником экзосом, доступным в больших объемах, изучение нуклеиновых кислот экзосом молока является актуальной задачей. Стандартный протокол выделения экзосом включает стадию ультрацентрифугирования, которое позволяет осадить везикулы. С помощью модифицированного протокола, включающего несколько стадий центрифугирования, ультрафильтрацию, ультрацентрифугирование, гель-фильтрацию и аффинную хроматографию, выделены экзосомы из человеческого и лошадиного молока. На основе препаратов нуклеиновых кислот, выделенных из полученных экзосом, приготовлены библиотеки мРНК, микроРнК и ДНК, которые в дальнейшем были проанализированы с помощью секвенирования нового поколения. Проведено сравнение нуклеиновых кислот, полученных на разных стадиях выделения экзосом из молока человека и лошади.