Izmenenie stromal'nykh kletok pod deystviem menstrual'noy zhidkosti v kontekste zazhivleniya endometriya

Abstract

Full Text

Эндометрий - уникальная часть женского организма, которая повреждается и затем полностью восстанавливается во время каждой менструации. Быстрая эпители-зация и отсутствие образования грануляционной ткани с дальнейшим образованием рубца являются важнейшими отличительными особенностями процесса его заживления. Стромальные клетки эндометрия (СКЭ) могут быть источником эпителиоцитов за счет мезенхимно-эпителиального перехода или особенным образом взаимодействовать с клетками эпителия, способствуя быстрой эпителизации. Также не исключено, что СКЭ устойчивы к действию стимулов, индуцирующих фиброплазию. При этом в настоящий момент не сложилось единого мнения о механизме участия СКЭ в регенерации эндометрия. Целью работы было расширение представлений о том, каким изменениям подвергаются СКЭ во время менструации. Задачи: оценить изменение маркеров эпителия (E-кадгерин, цитокератины), миофибробластов (а-гладкомышечный актин, винкулин), продукции белков межклеточного матрикса (фибронектин, коллаген I, коллаген IV, ламинин) под действием растворимых факторов менструального отделяемого здоровых женщин. СКЭ и менструальная жидкость, содержащая растворимые факторы были выделены по отработанному ранее протоколу из менструальной крови добровольных доноров (n=3). В качестве контроля использовали сыворотку венозной крови (СК), полученную во второй день менструации. Выделенные СКЭ 4-5 пассажа затем культивировали в присутствии 10% МЖ или СК в течение 9 дней. В конечной точке мы проводили визуализацию исследуемых молекул путем иммуноцитофлуоресции и количественный анализ методом иммуноблоттинга. Культивирование с МЖ статистически значимо (p<0,05) повышало количество коллагенов I и IV по сравнению с СК. При этом наблюдалось снижение количества фибронектина, винкулина и а-гладкомышечного актина, а количество ламинина и цитокератинов не отличалось. Белки межклеточного матрикса локализовались во внеклеточном пространстве, а-гладкомышечный актин - в стресс-фибриллах, при этом небольшая доля клеток была положительна на цитокератины. Таким образом, во время менструации под влиянием растворимых факторов окружения СКЭ увеличивают продукцию молекул межклеточного матрикса и компонентов базальной мембраны, необходимых для быстрого восстановления целостности и эпителизации. В то же время не отмечается признаков перехода СКЭ в миофибробла-сты, который возможен для этих клеток при культивировании с СК.