Vzaimodeystvie nekroptoza, autofagii i apoptoza pri mitoticheskoy katastrofe

Abstract

Full Text

Митотическая катастрофа - это состояние клетки, которое вызывается нарушениями в митозе, такими как грубые хромосомные аберрации или дефекты митотического веретена деления. Митотическая катастрофа представляет собой один из механизмов подавления формирования и роста опухолей, а также успешно используется в клинической практике, как стратегия лечения онкологических заболеваний. События, следующие за митотической катастрофой, напрямую зависят от баланса между белками, регулирующими пути гибели клеток. Таким образом, митотическая катастрофа может привести к апоп-тотической, некротической и аутофагической гибели клеток. В настоящее время механизм некротической гибели клеток, вызываемой митотической катастрофой, остается неизвестным. В данной работе митотическая катастрофа была индуцирована в клеточных линиях карциномы яичника (Caov-4) и колоректального рака (HCT116 wt и HCT116 p53-/-) с использованием химиотерапевтических препаратов в низких концентрациях, таких как доксорубицин (600 нМ), повреждающий ДНК, и колцемид (10 мкг/мл), деполимеризующий микротрубочки. Вестерн-блот анализ продемонстрировал увеличение фосфорилирования некроптотических эффекторов MLKL и RIP-1 после обработки клеток доксо-рубицином или колцемидом в течение 48 часов. В этих условиях в клеточных линиях Caov-4 и HCT116 детектировалось формирование комплекса RIPoptosome, обеспечивающего активацию RIP-1. Необходимо отметить, что клетки HCT116 р53-/- были более склонны к фос-форилированию RIP-1 и, соответственно, последующему некроптозу. Ингибирование некроптоза с использованием некростатина-^ повышало уровень апоптотической гибели клеток в HCT116 wt, а блокировка некроптоза в отсутствие р53 (HCT116 p53-/-) приводила к повышению уровня аутофагии. Однако, ингибирование аутофа-гии с использованием бафиломицина А1 не стимулировало RIP-1-зависимый некроптоз, а усиливало апоптоз. Согласно полученным данным, митотическая катастрофа, помимо апоптоза и аутофагии, приводит к RIP- 1 -зависимому некроптозу при обработке колцемидом или доксорубицином клеток Caov-4 и HCT116. При этом взаимосвязь между апоптозом, RIP-1-зависимым-некроптозом и аутофагией регулируется р53.