Full Text
Ожирение является одной из наиболее распространённых проблем современной медицины и сопряжено с высоким риском развития сахарного диабета 2 типа и других патологий. В основе ожирения лежит нарушение процесса адипогенеза. К настоящему моменту молекулярные механизмы адипогенеза изучены недостаточно, а применение лекарственных препаратов (агонисты PPARg тиазолидиндиноны), действующих на уже установленные регуляторы, сопряжено с возникновением множества побочных эффектов (JAMA Intern. Med. 2017 May 1;177(5)). Уточнение сигнальных каскадов и детальное изучение механизмов регуляции адипогезе-за позволит создать препараты направленного действия с меньшим количеством побочных эффектов. Недавно методом полногеномного исследования ассоциаций (GWAS) было обнаружено, что полиморфизмы в гене HHEX сопряжены с развитием диабета 2 типа и высоким индексом массы тела при рождении (World J. Diabetes. 2014 Apr 15; 5(2)). В данной работе исследована функция фактора транскрипции Hhex в регуляции адипогенеза в клеточной культуте мышиных преадипоцитов 3T3L1. Результаты. 1. Нокдаун Hhex приводит к дозозависимому подва-лению адипогенеза. Для создания нокдауна клетки 3T3L1 трансфицировали siRNA к Hhex. Уменьшение количества белка оценивали с помощью иммуноблоттинга. siRNA, максимально подавляющие Hhex, были использованы для уменьшения количества Hhex в клетках 3T3L1 в процессе дифференцировки в адипоциты. В качестве кон-тролей использовали клетки, трансфицированные олигонуклеотидом к мРНК люциферазы. Адипоцитарную дифференцировку индуцировали добавлением инсулина 1 мкг/мл, изобутилметилксантина 0,5 mM, дексаме-тазона 0,25 мкМ. Установили, что Hhex дозозависимо подавляет адипогенез в клетках 3T3L1. 2. Уровень белка и мРНК Hhex максимальны в первые 24 часа от начала адипоцитарной дифференцировки. Для уточнения момента активации гена Hhex в ходе адипогенеза исследовали изменение уровня белка и мРНК Hhex через 24 ч, 30 ч, 36 ч, 48 ч, 72 ч с момента индукции адипогенеза. Достоверно показано, что уровни белка и мРНК Hhex максимальны через 24 часа с момента индукции адипогенеза. Обсуждение. Мы показали, что Hhex дозозависимо подавляет адипогенез, действуя, по всей видимости, на ранних этапах дифференцировки, о чём свидетельствует кинетика уровней мРНК и белка. Возможно, Hhex участвует в индукции сигнальных каскадов, активных в момент наступления конфлюентности клеток (первые 24-48 часов адипогенеза).
