THE RELATIONSHIP OF CYTOKINES AND CHEMOKINES WITH THE MORPHOLOGY AND MINERALIZING POTENTIAL OF THE STROMAL FRACTION OF HUMAN BLOOD MONONUCLEAR LEUKOCYTES

Abstract

Full Text

Заболевания опорно-двигательного аппарата (ЗОДА) сложно поддаются лечению и нередко приводят к инвалидности пациентов, поэтому улучшение диагностики и лечения ЗОДА является одной из важных медико-социальных проблем. Целью исследования стала оценка возможного влияния цитокинов и хемокинов на морфологию и остеогенный потенциал стромальной фракции мононуклеарных лейкоцитов (МНЛ) крови человека после длительного культивирования. МНЛ, выделенные из венозной крови здоровых добровольцев, культивировали в течение 21 суток в питательной среде без остеогенных добавок, прилипающие клетки фиксировали в парах формалина и окрашивали ализариновым красным, проводили морфометрические подсчеты. Для измерения концентрации 22 цитокинов в супернатантах использовалась проточная цитометрия. В длительной культуре, помимо МНЛ с типичной морфологией, присутствовали фибробластоподобные клетки (ФК), что совпадает с литературными данными [1]. При окраске ализариновым красным отмечались небольшие единичные фокусы кальцификации межклеточного вещества вокруг ФК, в незначительном отдалении от ФК и в области межклеточного контакта МНЛ с ФК, что говорит о дистантном и контактном влиянии МНЛ на остеогенную дифференцировку и минерализацию клеточной культуры, обусловленную ФК. Была выявлена прямая корреляционная связь между количеством участков минерализации и числом ФК. В лунках с максимальным числом ФК концентрация провоспалительных цитокинов TNF-a, IL-6 и IL-17 была, соответственно, в 5, 10 и в 44 раза выше, а противовоспалительного хемокина MCP-1 (MCAF) - в 26 раз ниже. Таким образом, дифференцировка потомков МНЛ в остеобласты с последующей кальцификацией межклеточного матрикса может быть обусловлена ауто- и паракринной секрецией компонентов цитокиновой сети, обладающих известным остеомодулирующим потенциалом [2].