MORPHOLOGICAL ASPECTS OF BONE REGENERATION AFTER TISSUE-ENGINEERED GRAFTING

Abstract

Full Text

Актуальность исследования продиктована необходимостью использования принципиально нового остеозамещающего материала для пластики операционных дефектов в хирургии костного туберкулеза. Опыт по использованию в СПб НИИФ МЗ РФ ряда коммерческих остеозамещающих материалов для пластики дефектов кости выявил необходимость дополнительной стимуляции регенерации костной ткани при лечении туберкулезных оститов [1]. Нами разработана тканеинженерная конструкция (ТК) эквивалента костной ткани, состоящая из мезенхимных стволовых клеток (МСК) красного костного мозга (ККМ), коллагенового геля и стеклокристаллического материала «Биосит Ср-Элкор» (Россия) (биоситалл) [2]. Цель исследования - установить наличие жизнеспособных МСК в составе ТК, имплантированной в артифи-циальный дефект метафиза бедренной кости кроликов. Первичную культуру МСК ККМ кролика получали из костей задней конечности кролика породы Шиншилла. Суспензию клеток, предварительно окрашенных прижизненным флуоресцентным красителем PKH26, помещали в коллагеновый гель (2 мг/мл) вместе с гранулами био-ситалла (0,1-0,3 мм). Разработанные ТК применяли для восстановления смоделированного дефекта в метаэпифизарной области бедренной кости кроликов. Через 1, 2 и 4 мес кроликов выводили из эксперимента, производили забор материала костной ткани, располагающейся на месте дефекта, и изготавливали гистологические (криостатные) срезы. Наличие клеток определяли методом конфокальной микроскопии при длине волны 560 нм. Результаты гистологического исследования показали, что к 30 сут эксперимента дефект в метаэпифизар-ной области бедренной кости с имплантированным материалом заполняется хорошо оформленными костными трабекулами. Заживление дефекта происходит по механизму регенерации пластинчатой костной ткани. На препаратах встречаются группы окрашенных PKH26 клеток. Флуоресцентно-меченые клетки выявляются как на ранних сроках, так и спустя 4 мес после имплантации, однако количество их уменьшается. Можно заключить, что выполненное исследование выявило наличие жизнеспособных имплантированных МСК в месте дефекта в течение длительного периода времени, что подтверждает их участие в процессе регенерации.