INFLUENCE OF LOW-INTENSIVE LASER RADIATION OF LENGTH OF 0,63 MKM WAVE ON INCREASED EXPRESSION OF GENES АСАМ SOX9, TGFB3, COL2A1 OF MESENCHIMAL MULTIPOTENT STROMAL CELLS

Abstract

Full Text

Способности к восстановлению хрящевой ткани суставов крайне ограничены. Повреждения, возникающие в гиалиновом слое хряща, со временем лишь увеличиваются, приводя к дальнейшим дегенеративным процессам, катализируемым большими механическими нагрузками и аваскулярной природой гиалиновой ткани. Современным хирургам доступно большое количество клинических методик, направленных на восстановления гиалинового хряща, однако, в полном объёме задача до сих пор не решена. В настоящее время разрабатываются различные перспективные способы для индуцирования пролиферации хрящевой ткани. Одним из таких направлений является воздействие на клетки низкоинтенсивным лазерным излучением. Целью данного исследования было изучить влияние излучения длиной волны 0.63 мкм на экспрессию генов Acan, sox9, tgfb3, col2a1, связанных с дифференциров-кой в хондрогенном направлении в мезенхимальных мультипотентных стволовых клетках (ММСК). ММСК выделяли из бедренных костей половозрелых крыс и культивировали до 3 пассажа. Данные цитофлюорометрического анализа подтвердили принадлежность к ММСК по экспрессии маркеров CD45 и CD90. Культуру клеток каждый час в течение 15 минут облучали с использованием малогабаритного лазера с длиной волны 0,63 мкм и мощностью 1,7 мВт. Клетки культивировались при температуре 37оС и 5% CO2. Спустя 7, 14 и 21 суток облучения из культуры выделяли РНК, получали кДНК и анализировали экспрессию генов acan, sox9, tgffi3, col2a1 методом RT-PCR. Выявлено увеличение экспрессии изучаемых генов на всех сроках наблюдения по сравнению с клетками до облучения. Данный факт свидетельствует о возможном клиническом применение лазерного излучения длиной волны 0,63 мкм для активации процесса восстановления поврежденного гиалинового хряща при различных заболеваниях, однако, требуются дополнительные исследования направленные на исследование причин выявленных закономерностей.