Urokinaznyy retseptor moduliruet povedenie progenitornykh kletok serdtsa i opredelyaet ikh reparativnye svoystva posle infarkta

Abstract

Full Text

Прогениторные клетки сердца (ПКС) являются важным регулятором клеточного гомеостаза и участником репаративных процессов в сердце. Несмотря на многообещающие результаты доклинических и клинических исследований по трансплантации ПКС при инфаркте и хронической сердечной недостаточности механизмы регуляции функций этого типа клеток малоизуче-ны. Известно, что урокиназный рецептор (uPAR), присутствующий на поверхности многих типов клеток, участвует в регуляции множества клеточных функций. Однако, его роль в регуляции репаративных функций ПКС не установлена. Цель исследования: изучить влияние uPAR на устойчивость к апоптозу, пролиферативные свойства ПКС и их участие в репарации после инфаркта. Методы. В работе использованы ПКС, полученные из миокарда мышей линии C57Bl6 с помощью метода эксплантаной культуры и последующей иммуномаг-нитной селекции. Оценку иммунофенотипа проводили с помощью проточной цитофлуориметрии. Подавление экспрессии uPAR выполняли с использованием shRNA лентивирусных частиц ("Santa Cruz”) и последующей селекции на пуромицине. Оценка выживаемости клеток выполнялась МТТ тестом, апоптоза - Caspase-Glo® 3/7 Assay System. Оценка репаративных свойств ПКС проводилась на модели инфаркта миокарда с последующей оценкой функции сердца с помощью эхокардиографии. Результаты. Показано, что uPAR присутствует на поверхности большинства ПКС и его взаимодействие с лигандом (витронектином) увеличивает пролифера-тивный потенциал этих клеток. Подавление uPAR приводило к подавлению клонообразования и способности к делению как в присутствии витронектина, так и без него. uPAR(-) клетки были более подвержены гибели при культивировании в отсутствии сыворотки и под действием H2O2 индуцированного стресса. Интрамиокардиальная трансплантация uPAR (+) ПКС после инфаркта миокарда способствовала увеличению показателей систолической функции сердца, в то время как трансплантация uPAR (-) клеток или контрольной среды такого эффекта не вызывала. Полученные результаты свидетельствуют о том, что экспрессия uPAR может способствовать выживаемости ПКС после трансплантации и регулирует репаративные свойства этих клеток. Механизмы этого влияния uPAR являются предметом дальнейшего изучения.