Sravnenie protivovospalitel'nogo deystviya sekretoma mezenkhimal'nykh stromal'nykh kletok korov in vitro

Abstract

Full Text

Иммунокорригирующая активность мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани коров (МСК), индуцированных дексаметазоном (DEX), может быть использована при разработке препарата для иммунопрофилактики инфекционной заболеваемости животных. По сравнению с клетками из других органов, МСК жировой ткани легче выделять и культивировать для получения биологически активных факторов, которые могут быть применены в терапии различных заболеваний животных. Цель. Оценить влияние секретома коровьих МСК обработанных DEX на продукцию ИЛ-1р и ИЛ-10 монону-клеарами периферической крови (МПК). Материалы и методы. МСК выделяли с помощью 0,075% раствора коллагеназы 2 типа. для получения секретома клетки обрабатывались DEX, затем культивировались 3 суток на бессывороточной среде. После этого клетки замораживали вместе с секретомом без криопротектора. После оттаивания формировался клеточный лизат с секретомом. В связи с отсутствием тест-систем для КРС для оценки иммунотропного влияния секрето-ма использовали моноуклеары периферической крови (МПК) человека. МПК сеяли в 96-луночные планшеты по 200 тыс. клеток на лунку с добавлением исследуемого секретома МСК. для стимуляции продукции цитокинов к МПК добавляли липополисахарид 100 нг/мл. Планшет инкубировали 24 ч в стандартных условиях, затем центрифугировали и отбирали супернатант для исследования концентрации цитокинов. Определение уровня ИЛ-1 р и ИЛ-10 проведено с помощью наборов для ИФА (Вектор-БЕСТ, Россия). Результаты. Клеточный лизат с секретомом коровьих МСК, обработанных DEX, усиливал ЛПС-стимулированную продукцию цитокинов человеческими МПК: выработка ИЛ-1р стимулировалась в 3,52 раза, выработка ИЛ-10 - в 1,91 раз. При этом без ЛПС он не стимулировал продукцию цитокинов. Таким образом, выявлен потенцирующий эффект лизата и сектрето-ма коровьих МСК на человеческие МПК. данный эффект требует дальнейшего изучения.