Vliyanie val'proevoy kisloty, eritropoetina i deksametazona na funktsional'nuyu aktivnost' mezenkhimal'nykh stvolovykh kletok

Abstract

Full Text

Возможность модуляции функциональной активности мезенхимальных стволовых клеток (МСК) эритропо-этином (EPO), вальпроевой кислотой (VPA) и дексамета-зоном (DEX) ещё не реализована в мире. Есть данные, что EPO повышает выживаемость МСК при их совместном введении, EPO снижает воспалительное микроокружение язв диабетической стопы. Показано, что лечение с применением VPA ингибирует пролиферацию, диффе-ренцировку МСК, влияет на гемопоэтические клетки-предшественники. Установлены индуктивные свойства DEX в плане усиления противовоспалительной активности эмбриональных фибробластов. В качестве исследуемых цитокинов выбраны провоспалительные цитокины: IL-1 р, TNF-a, IL-17A, IL-23, IL-9; противовоспалительные цитокины: IL-10, IL-27; внутрисистемные иммунные регуляторы: IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IFN-y, IL-21; цитокины с внеиммунными эффектами: IL-22, GM-CSF. Цель. Установить изменения функциональной активности МСК из жировой ткани in vitro после обработки VPA, EPO, DEX. Материалы и методы. МСК были выделены из жира 6 доноров с использованием коллагеназы. МСК рассеивали в 2 планшета, обрабатывали 1 МЕ/мл EPO, 20 мкг/ мл VPA или 10 мкмоль/мл DEX. Инкубировали 3 ч, отмывали, культивировали в стандартных условиях 72 ч. Мононуклеары из крови доноров выделяли в градиенте плотности фиколла, добавляли в планшеты с МСК, туда же добавляли фитогемагглютенин 1 0 мкг/мл, липопо-лисахарид 100 нг/мл. Через 24, 48 ч отбирали из лунок супернатант для исследования цитокинов. Концентрации цитокинов определяли на мультиплексном анализаторе MAGPIX. Статистическая обработка результатов проведена в программе xPonent 4.2. Результаты. МСК, стимулированные DEX, достоверно снижают продукцию цитокина, активирующего цитотоксический Т-клеточный ответ, - IFN-y. Также эти клетки показали тенденцию к подавлению продукции IL-4 и IL-5, играющих важную роль в развитии IgE-опосредованных аллергических реакций. В отдельных случаях нативные и обработанные EPO/VPA МСК жировой ткани вызывали резкое усиление или незначительное снижение продукции IL-22, GM-CSF. Учитывая роль IL-22 в стимуляции защитных и регенеративных процессов в слизистых оболочках, а GM-CSF в миело-идном гемопоэзе, целесообразно увеличение исследуемой группы и вариация доз препаратов. Таким образом, использование EPO, VPA интересно в отношении стимуляции защитных свойств слизистых оболочек. Продукция регуляторных цитокинов IFNy и IL-2 снижалась под влиянием стимулированных DEX МСК, что говорит о возможном подавлении иммунного ответа.