Izmenenie proliferativno-differentsirovochnogo potentsiala mezenkhimnykh stromal'nykh kletok kak pokazatel' stareniya na kletochnom urovne

Abstract

Full Text

Мезенхимные стромальные клетки представляют большой интерес для современной науки в связи с их потенциальным использованием в регенеративной медицине. Как стволовые клетки, они обладают способностью к самообновлению и дифференцировке - процессам, от которых зависит размер популяции и ее регенеративный потенциал. При исследовании старения МСК используются клетки, выделенные из доноров разного возраста, а также продолжительное пассирование клеток в культуре. Ранее было показано, что так называемое «время удвоения» популяции как на ранних, так и на поздних пассажах выше у пожилых доноров, а также значительно увеличивается с каждым последующим пассажем. Кроме того, отмечается снижение мультипо-тентности дифференцировки и проявление признаков репликативного старения. Целью нашего исследования являлось выяснение того, как пролиферативная активность и дифференциро-вочный потенциал изменяется в процессе старения МСК жировой ткани человека. Мы измерили их митотическую активность и эффективность адипогенной дифферен-цировки в зависимости от возраста донора, при разной плотности посадки и на разных пассажах. Все изучаемые процессы наблюдались в режиме реального времени и на уровне одиночных клеток, что в совокупности с большим статистическим объемом данных позволило говорить о высоком уровне достоверности результатов. В процессе исследования нам удалось выяснить, что при одинаковом пассаже клетки, высаженные в большей плотности, эффективнее переходят в адипогенную диф-ференцировку. Данное наблюдение подтверждалось для клеток как пожилых, так и молодых доноров. Вероятнее всего, данный эффект объясняется паракринными факторами, секретируемыми МСК. Кроме этого, нами была выявлена прямая зависимость дифференцировочного потенциала от номера пассажа культивируемых МСК. Так, по мере пассирования данный показатель возрастал в 4-5 раз. Эти данные позволяют говорить о том, что при старении МСК в большей степени подвержены адипогенной дифференцировке, что может быть связано с тем, что они выходят из состояния стволовости и ком-митируются в направлении дифференцировки. Таким образом, в данной работе был выявлен ряд закономерностей изменения МСК, понимание которых необходимо для контролируемого использования этих клеток в регенеративной медицине.