REZUL'TATY IZUChENIYa KOLIChESTVA AL'DEGIDDEGIDROGENAZA-POLOZhITEL'NYKh MEZENKhIMAL'NYKh KLETOK KOSTNOGO MOZGA DONOROV

Abstract

Full Text

В настоящее время активно изучают иерархическую структуру мезенхимального компонента костного мозга. Установлено наличие стволовых мезенхимальных клеток-предшественниц с высоким пролиферативным потенциалом, обеспечивающих самоподдержание популяции. Тем не менее, не определены иммунологические маркеры стволовых элементов мезенхимальной природы. Известно, что в ранних клетках-предшественниках различных тканевых линий высока экспрессия фермента альдегиддегидрогеназы (ALDH). В то же время практически отсутствуют данные о количестве и динамике содержания ALDH-положительных (ALDH+) элементов в культуре мезенхимальных стромальных клеток (МСК) костного мозга доноров, и их возможной связи с показателями скорости роста культуры. Цель работы - оценка значимости определения количества ALDH+ мезенхимальных стромальных клеток костного мозга доноров. Выявлено значимое уменьшение относительного содержания ALDH+ мезенхимальных клеток с 59,2±18,0% (пассаж Р1, n=10) до 28,2±10,7% (Р3, n=10) и их абсолютного количества от 28,4±19,5х106 (Р1) до 7,5±3,8х106 (Р3; критерий Уилкоксона, p=0,024). Установлено снижение пролиферативной активности МСК в процессе культивирования по увеличению времени удвоения количества клеток от 59,9±1 8,5 ч (Р1 , n=10) до 106,6±19,2 ч (Р3, n=10, критерий Уилкоксона р=0,02). Зарегистрировано достоверное увеличение сроков достижения культурой МСК конфлюэнтного монослоя с 9,4±2,0 сут. (Р1) до 13,7±2,5 сут. (Р3, n=10, критерий Уилкоксона, p=0,02). Известно, что показатели скорости роста культуры МСК зависят от количества клеток с высоким пролифе-ративным потенциалом. В этой связи проведен анализ зависимости между содержанием ALDH+ клеток и временем достижения конфлюэнтного монослоя (коэффициент Пирсона r=-0,66), и между количеством ALDH+ элементов, внесенных в культуру на Р1 - Р3, и временем удвоения клеток на данных пассажах (r=-0,67). Т.е., период удвоения клеточной популяции и время достижения 90-95% покрытия культуральной поверхности в значительной степени зависят от количества ALDH+ МСК. С учетом определения стволовых клеток как элементов, обеспечивающих самоподдержание популяции, а также зависимости между показателями скорости роста культуры и количеством ALDH+ клеток, можно заключить, что указанный маркер характеризует фракцию ранних мезенхимальных клеток-предшественниц (стволовые и мультипотентные клетки).