Vliyanie napravlennoy regulyatsii AFK na immunomodulyatornuyu aktivnost' mul'tipotentnykh mezenkhimnykh stromal'nykh kletok

Abstract

Full Text

Мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (МСК) по результатам ряда доклинических и клинических исследований считаются эффективными для терапии аутоиммунных заболеваний. Однако гетерогенность МСК, затрагивающая, как уже показано, пролиферативную, колониеобразующую активность МСК, дифференци-ровочный потенциал, уровень АФК, создаёт сложности для их применения. На текущий момент малоизученным остаётся вопрос о влиянии особенностей функционального состояния МСК на иммуномодуляторные свойства. Данное исследование направлено на выявление связи регуляции функций МСК, сопряжённой с изменением уровня АФК, и метаболической и иммуномоду-ляторной активности МСК в процессе взаимодействия с активированными аллогенными иммунными клетками. Предварительные тесты показали повышение уровня АФК в МСК при праймировании их ИФН-у в течение 16 ч, а также снижение уровня АФК при инкубации с антиоксидантом N-ацетил^-цистеин (NAC). Далее МСК, пре-кондиционированные с ИФН-у либо NAC, в течение суток сокультивировали с ФГА-стимулированными аллоген-ными мононуклеарами периферической крови (МНК) при разделении полупроницаемой мембраной транс-велл. Окрашивание специфическими флуоресцентными зондами выявило, что МНК стимулировали повышение уровня АФК в МСК, при этом предобработка ИФН-у сходно с NAC могла ослаблять этот эффект. Наблюдалась тенденция к снижению трансмембранного потенциала митохондрий под воздействием МНК, чему также способствовало прекондиционирование с NAC. Метаболическая активность МСК, оцененная по способности восстанавливать краситель Alamar Blue, практически не менялась. Праймирование ИФН-у, а также взаимодействие с МНК приводило снижению объёма эндосомального компар-тмента. Прекондиционирование МСК, регулирующее уровень АФК, не влияло на способность модулировать экспрессию маркёров активации CD25, CD69 на МНК. А при взаимодействии МНК с ИФН-у-праймированными МСК наблюдалось некоторое повышение экспрессии HLA-DR. Регуляция МСК при помощи ИФН-у и NAC приводила к небольшому снижению способности ингибировать пролиферацию и индуцировать гибель активированных МНК. Таким образом, направленная регуляция уровня АФК в МСК вызывает изменение эндосомального компар-тмента, активности митохондрий, а также регулирует иммуномодуляторную активность МСК при взаимодействии с аллогенными активированными МНК.