Izmenenie aktivnosti trombotsitov posredstvom ligandov T-kadgerina: lipoproteidov nizkoy plotnosti i adiponektina

Abstract

Full Text

Помимо обеспечения гемостаза тромбоциты играют важную роль в регенерации поврежденных сосудов и тканей. В последние годы экспериментальные и клинические исследования применения плазмы, обогащённой тромбоцитами (PRP), продемонстрировали её эффективность для лечения ран и при регенерации тканей. Для подготовки PRP с высоким регенеративным потенциалом необходимо понимание молекулярно-клеточных механизмов регуляции функций тромбоцитов в норме и при патологии, поскольку их активность существенно варьируется. Так при ожирении происходит изменение профиля липидов и гормонов жировой ткани, что приводит к гиперактивности тромбоцитов. Недавно нам удалось обнаружить на тромбоцитах рецептор липопротеидов низкой плотности (ЛПНП), способный вызывать внутриклеточную кальциевую сигнализацию, - Т-кадгерин. Используя методы проточной цитометрии и конфокальной микроскопии мы подтвердили наличие Т-кадгерина как на тромбоцитах человека, так и на мегакариоцитах (линия MEG-01). По данным иммуноблота кажущаяся молекулярная масса Т-кадгерина на тромбоцитах отличается от таковой в эндотелиальных клетках (105 и 130 кДа) и составляет более 160 кДа. Наличие гликозилфосфатидилинозитид-ного якоря, характерного для этого белка в других клетках, у тромбоцитарной формы Т-кадгерина было проверено с помощью специфической фосфолипазы PI-PLC. После обработки ферментом количество Т-кадгерина снижалось, что говорит о присутствии ГФИ-заякоренного Т-кадгерина и на тромбоцитах, и на мегакариоцитах. Анализ образцов РНК тромбоцитов и мегакариоцитов при помощи полимеразной цепной реакции с последующим секвенированием показал, что в этих клетках присутствует изоформа-1 как и в других клетках. Помимо ЛПНП у Т-кадгерина есть другой лиганд - гормон жировой ткани адипонектин. Этот гормон, напротив, снижает активность тромбоцитов, как на уровне кальциевой сигнализации, так и на уровне распластывания и адгезии. Снижение концентрации адипонектина при ожирении усугубляет гиперактивность тромбоцитов. Таким образом, в настоящем исследовании при использовании различных концентраций ЛПНП и адипо-нектина была показана важность Т-кадгерин как регулятора активности тромбоцитов и необходимость контроля показателей плазмы при использовании PRP.