Biological properties of the diploid strain cells of kidneys from bat Pipistrellus nathusii

Abstract

Full Text

В настоящее время установлено, что резервуаром и переносчиками целого ряда особо опасных антропозоонозных вирусных инфекций являются представители отряда Рукокрылых. Из материала от летучих мышей выделены лиссавирусы, коронавирусы (возбудитель тяжёлого острого респираторного синдрома, ближневосточного респираторного синдрома), парамиксовирусы (возбудитель болезни Хендра, болезни Нипах), филовирусы (возбудители геморрагической лихорадки Марбург, болезни Эбола). В тоже время роль летучих мышей в эпидемиологии вирусных инфекций для Российской Федерации изучена недостаточно. В целом, анализ данных по вирусоносительству среди летучих мышей свидетельствует о высоком уровне пер-миссивности клеток тканей и органов этого вида млекопитающих к вирусам различных таксономических групп. Целью исследований явилось получение нового диплоидного штамма клеток из почечной ткани летучих мышей, обитающих и мигрирующих на территории Российской Федерации и изучение их чувствительности к вирусам векторных инфекций, представляющих опасность для сельскохозяйственных животных. Для достижения поставленной цели были отловлены с использованием туман-сети в Волгоградской области три летучие мыши вида Pipistrellus nathusii и в лабораторных условиях после анестезии рометаром, умерщвлены путем цервикальной дислокации для отбора почек. Путем проведения стандартной трипсинизации из коркового слоя почек была получена первичная культура клеток. Клетки культивировали в питательной среде DMEM с 10% фетальной сыворотки крови КРС (FBS). Культуру пересевали раз в неделю и на первых трех пассажных уровнях конфлюэнтный монослой состоял преимущественно из эпителиоподобных полигональных клеток с небольшим числом веретеновидных, отросчатых клеток и фибробластов. Начиная с четвертого пассажа фенотип клеток был представлен однородными эпителиоподоб-ными клетками с четкими границами и мелкозернистой цитоплазмой и в целом укладывался в определение диплоидного штамма. Клетки криоконсервированы в жидкий азот на уровне 4 и 9 пассажей. Установлена пермиссивность диплоидного штамма клеток почек летучей мыши Pipistrellus nathusii к вирусам блютанга, заразного узелкового дерматита и миксо-мы кроликов.