Association of TNF, MMP9, CYBA polymorphism with subclinical arterial wall changes and cardiovascular diseases risk factors

Full Text

Введение Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются ведущей причиной заболеваемости и смертности во всем мире, в том числе и в Российской Федерации [1]. К важным факторам риска развития ССЗ относятся субклинические изменения артериальной стенки: повышение артериальной жесткости, утолщение комплекса интима-медиа, появление атеросклеротических бляшек, эндотелиальная дисфункция [2]. Связь таких традиционных факторов риска как гликемия натощак, липидный профиль, параметры периферического и центрального артериального давления, наличие сахарного диабета 2 типа, ожирения и артериальной гипертензии c субклиническими изменениями артериальной стенки не вызывает сомнения. В последние годы активно изучается роль новых факторов риска ССЗ: инсулин плазмы крови, инсулиноподобный фактор роста, длина теломер лейкоцитов [3], связь которых с субклиническими изменениями артериальной Гены & Клетки, том XV, № 2, 2020 82 КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ стенки была показана в работах ряда авторов [4-6]. Кроме того, усиление хронического воспаления и окислительный стресс также относятся к факторам, влияющим на состояние артериальной стенки [2]. Вклад полиморфизма генов в развитие ССЗ изучен недостаточно. В то же время имеется ряд работ, в которых описана связь генов фактора некроза опухоли-а (ФНО-а), матриксной металлопротеиназы 9 типа (ММП 9) и легкой цепи цитохрома b с ишемической болезнью сердца (ИБС) [7-9], ишемическим инсультом [10, 11], артериальной гипертензией [12]. Изучение связи полиморфизмов именно этих генов с субклиническими изменениями артериальной стенки представляется важным в связи с тем, что эти гены кодируют белки, участвующие в развитии хронического воспаления и окислительного стресса. Данные процессы лежат в основе старения (субклинических изменений) артерий. Выявление факторов, включая генетические, тесно связанных с изменениями артериальной стенки, позволит выделить группу лиц, нуждающихся в самых эффективных мерах профилактики ССЗ. Целью работы было изучение связи полиморфизма генов ФНО-а (TNF), ММП 9 (MMP9) и легкой цепи цитохрома b (CYBA) со скоростью пульсовой волны, толщиной комплекса интима-медиа, эндотелий-зависимой вазодилатацией, наличием атеросклеротических бляшек и факторами риска ССЗ у относительно здоровых людей разного возраста. Материал и методы В исследование были включены 160 человек (55 мужчин и 105 женщин) в возрасте от 25 до 82 лет, обратившихся в МНОЦ МГУ имени М.В. Ломоносова для профилактического осмотра в 2018-2019 гг. Критериями исключения были любые известные хронические неинфекционные заболевания, в том числе ССЗ, артериальная гипертензия 3 степени, онкологические заболевания, а также регулярный прием антигипертензивных, гиполи-пидемических, сахароснижающих и других препаратов, беременность и период лактации, отказ от участия в исследовании. Все пациенты подписывали информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом МНОЦ МГУ (протокол № 5 от 10.09.2018). Всем пациентам измеряли антропометрические показатели: окружность талии и бедер, их соотношение, вес, рост; уровень систолического и диастолического артериального давления (САД, ДАД) измеряли на калиброванном приборе с использованием плечевой манжеты (HEM-7200 M3, Omron Healthcare, Kyoto, Japan). Артериальную гипертензию диагностировали при значении САД>140 мм рт. ст. и (или) ДАД>90 мм рт. ст. Скорость пульсовой волны и параметры центрального артериального давления (центральное систолическое и диастолическое, пульсовое и центральное среднее артериальное давление) определяли методом аппланационной тонометрии на приборе SphygmoCor 9.0 hardware (Atcor, Sydney). Значение скорости пульсовой волны >10 м/с считали повышенным. Ультразвуковое исследование каротидных артерий проводили с применением системы PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). Наличие атеросклеротических бляшек диагностировали как фокальное утолщение стенки сосуда более чем на 50% по сравнению с окружающими участками стенки сосуда или как фокальное утолщение комплекса интима-медиа более чем на 1,5 мм, выступающее в просвет сосуда. Значение толщины комплекса интима-медиа >0,9 мм считали повышенным. Эндотелий-зависимую вазодилатацию определяли с помощью пробы с реактивной гиперемией, используя систему PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). За эндотелиальную дисфункцию принимали эндотелий-зависимую вазодилатацию <10%. Биохимические параметры крови: общий холестерин (ОХ), холестерин липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), триглицериды (ТГ), глюкоза натощак, креатинин, гликированный гемоглобин НЬА1с) и альбумин мочи определяли рутинными методами. Значение липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) вычисляли по формуле: ХС ЛПНП=ОХ-(ТГ/2,2+ХС ЛПВП). За альбуминурию принимали значение альбумина мочи >30 мг/л. Сахарный диабет 2 типа диагностировали при значении глюкозы натощак >7,0 ммоль/л или НЬА1с>6,5%. Иммунореактивный инсулин крови определяли методом хемилюминесценции. Индекс инсулинорезистентности HOMA рассчитывали по формуле: концентрация глюкозы натощак (ммоль/л) х иммунореактивный инсулин натощак (мкЕД/л)/22,5. Инсулинорезистентность диагностировали при HOMA>2,5. Инсулиноподобный фактор роста определяли с помощью твердофазного хемилюминесцентного иммуноферментного анализа, альдостерон крови - иммуноферментным методом. Длину теломер лейкоцитов на геномной ДНК определяли методом ПЦР в режиме реального времени с использованием реактивов фирмы Applied Biosystems (США) [13]. Аллельные варианты генов выявляли методом ПЦР в режиме реального времени с применением наборов фирмы ДНК-Технология (Россия) для генов TNF и mMp9 и наборов фирмы Applied Biosystems (США) для гена CYBA. ДНК выделяли из образцов цельной крови с помощью набора Qiagen DNA blood mini kit (Германия) согласно инструкции фирмы-производителя. Статистический анализ Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета статистических программ SPSS version 11.0 for Windows (SPSS, Inc., Chicago, IL, США). Для параметров с нормальным распределением приведены значения среднего (M) и стандартное отклонение среднего (SD), для параметров с распределением, отличным от нормального, - медиана (Ме), нижний (LQ) и верхний (UQ) квартили. Распределение на нормальность проверяли по критерию х2 Пирсона. При сравнении двух групп с различными генотипами различия оценивали с помощью критерия х2 Пирсона, при сравнении трех групп с различными генотипами использовали метод дисперсионного анализа и критерий Круксала-Уоллиса. Для оценки влияния исследуемого показателя с учетом вклада остальных влияющих переменных применяли метод построения модели многофакторной логистической регрессии. Логистическую регрессионную модель строили с принудительным включением набора всех факторов, затем методом исключения Вальд строили урезанную модель с уменьшенным количеством факторов. Различия считали статистически значимыми при значении p<0,05. Результаты и обсуждение Клиническая характеристика 1 60 пациентов, включенных в исследование, представлена в табл. 1. Связь полиморфизма -238G>A гена TNF c еостоянием артериальной стенки и факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний Ген TNF расположен на коротком плече 6 хромосомы в локусе 6p21.33. Однонуклеотидный полиморфизм -238G>A гена TNF представляет собой замену гуанина Гены & Клетки, том XV, № 2, 2020 КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ 83 Таблица 1. Клиническая характеристика пациентов, включенных в исследование Показатель Общая группа (n=160) Возраст (лет), M±SD 50,42±13,34 Мужчин (n, %) 55 (34,4) ОТ/ОБ, M±SD 0,86±0,1 Ожирение (n, %) 41 (25,63) САД (мм рт. ст.), M±SD 126,26±17,11 ДАД (мм рт. ст.) M±SD 79,28±10,65 Центральное САД (мм рт. ст.) М±SD 116,95±18,11 Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±SD 79,86±11,32 Центральное пульсовое АД (мм рт. ст.) Мед. (Нкв-Вкв) 34,0 (28,0-42,0) Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±SD 95,44±13,11 АГ (n, %) 44 (27,5) ОХ (ммоль/л), M±SD 3,85±1,02 ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD 3,85±1,02 ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD 1,20±0,32 ТГ (ммоль/л), Me (LQ-UQ) 0,97 (0,71-1,39) ГН (ммоль/л), Ме (LQ-UQ) 5,30 (4,90-5,80) НвА1с (%), Me (LQ-UQ) 5,20 (5,00-5,55) ИРИ (мкЕД/л), Ме (LQ-UQ) 7,40 (5,60-10,70) НОМА, Ме (LQ-UQ) 1,80 (1,34-2,57) ИР (n, %) 44 (28,2) СД 2 (n, %) 21(13,13) Креатинин (мкмоль/л), М±SD 84,11±15,59 ИПФР-1 (нг/мл), Ме (LQ-UQ) 143,50 (112,00-190,25) Альдостерон (пг/мл), Ме (LQ-UQ) 72,00 (39,75-117,25) АМ (мг/л), Ме (LQ-UQ) 8,15 (5,00-14,00) АУ (n, %) 7 (5,5) ДТЛ, M±SD 9,82±0,44 СПВ (м/с), M±SD 10,74±2,58 СПВ > 10 м/с (n, %) 58,75 ТКИМ (мм), Ме (LQ-UQ) 0,7 (0,58-0,80) ТКИМ>0,9 мм (n, %) 22 (14,8) АСБ (n, %) 67 (45) ЭЗВД (%), M±SD 10,76±3,55 ЭД (n, %) 58 (39,7) Полиморфизм -238G>A гена TNF, генотипы GG/GA/AA (n, %) 149 (93,75); 9 (5,63); 1 (0,63) Полиморфизм -1562С>Т гена MMP9, генотипы СС/СТ/ТТ (n, %) 105 (65,63); 51 (31,86); 4 (2,5) Полиморфизм с.214Т>С гена CYBA, генотипы ТТ/ТС/CC (n, %) 20 (12,5); 69 (43,13); 71 (44,38) Примечание: ОТ/ОБ - отношение окружности талии к окружности бедер; САД - систолическое артериальное давление; ДАД - диастолическое артериальное давление; АГ - артериальная гипертензия; ОХ - общий холестерин; ХС ЛПНП - холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП - холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ - триглицериды; ГН - глюкоза натощак; НвА1с - гликированный гемоглобин; ИРИ - иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА - индекс инсулинорезистентности; ИР - наличие инсулинорезистентности; СД 2 - сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 - инсулиноподобный фактор роста; АМ - альбумин мочи; АУ - альбуминурия; ДТЛ - длина теломер лейкоцитов; СПВ - скорость пульсовой волны; ТКИМ - толщина комплекса интима-медиа; АСБ - наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД - эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД - эндотелиальная дисфункция. Гены & Клетки, том XV, № 2, 2020 84 КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ Таблица 2. Клиническая характеристика групп пациентов с GG и GA генотипами полиморфизма -238G>A гена TNF Показатель GG (n=150) GA (n=9) Значение p Возраст (лет), M±SD 50,31±2,13 50,44±9,37 0,771 Мужчин (n, %) 51 (34,23) 3 (33,33) 0,951 ОТ/ОБ, M±SD 0,86±0,02 0,89±0,07 0,731 Ожирение (n, %) 39 (26,17) 2 (22,22) 0,793 САД (мм рт. ст.) M±SD 126,5±2,75 122,89±11,65 0,599 ДАД (мм рт. ст.), M±SD 79,41±1,71 77,78±7,30 0,624 Центральное САД (мм рт. ст.) М±SD 117,36±2,97 112,33±11,96 0,590 Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±SD 80,20±1,86 75,56±7,04 0,218 Центральное пульсовое АД (мм рт. ст.) M±SD 37,16±2,11 336,78±8,85 0,883 Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±SD 95,81±2,15 91,00±8,35 0,576 АГ (n, %) 42 (28,19) 2 (22,22) 0,697 ОХ (ммоль/л), M±SD 5,60±0,18 5,57±0,74 0,890 ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD 3,85±0,16 3,81±0,82 0,856 ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD 1,20±0,05 1,11±0,24 0,249 ТГ (ммоль/л), Me (LQ-UQ) 0,98 (0,69-1,39) 0,91 (0,78-2,02) 0,431 ГН (ммоль/л), Ме (LQ-UQ) 5,3 (4,9-5,8) 5,3 (4,8-5,9) 0,785 НвА1с (%), Me (LQ-UQ) 5,2 (4,9-5,6) 5,1 (5,1-5,2) 0,020 ИРИ (мкЕД/л), Ме (LQ-UQ) 7,30 (5,55-10,45) 10,15 (7,30-15,95) 0,489 НОМА, Ме (LQ-UQ) 1,77 (1,33-2,54) 2,15 (1,60-4,44) 0,655 ИР (n, %) 41 (27,89) 3 (37,5) 0,557 СД 2 (n, %) 20 (13,42) 1 (11,11) 0,841 Креатинин (мкмоль/л), М±SD 84,45±2,55 79,56±6,61 0,483 ИПФР-1 (нг/мл), Mе (LQ-UQ) 145 (112-187) 126,0 (109,5-221,5) 0,032 Альдостерон (пг/мл), М±SD 72,0 (38,0-115,5) 73,5 (51,5-138,0) 0,021 АМ (мг/л), Ме (LQ-UQ) 9 (5-14) 5 (3-6) 0,056 АУ (n, %) 9 (5-14) 5 (3-6) 0,056 ДТЛ, M±SD 9,83±0,07 9,76±0,16 0,417 СПВ (м/с), M±SD 8,66±0,34 7,50±0,75 0,514 СПВ>10 м/с (n, %) 20 (14,29) 2 (25) 0,407 ТКИМ (мм), Ме (LQ-UQ) 0,71±0,03 0,72±0,18 0,788 ТКИМ>0,9 мм (n, %) 20 (14,29) 2 (25) 0,407 АСБ (n, %) 61 (43,57) 5 (62,5) 0,295 ЭЗВД (%), Ме (LQ-UQ) 11 (8-13) 9 (7,5-11,75) 0,796 ЭД (n, %) 53 (38,4) 5 (71,4) 0,082 Примечание: ОТ/ОБ - отношение окружности талии к окружности бедер; САД - систолическое артериальное давление; ДАД-диастолическое артериальное давление; АГ - артериальная гипертензия; ОХ - общий холестерин; ХС ЛПНП - холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП - холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ - триглицериды; ГН - глюкоза натощак; НвА1с - гликированный гемоглобин; ИРИ - иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА - индекс инсулинорезистентности; ИР - наличие инсулинорезистентности; СД 2 - сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 - инсулиноподобный фактор роста; АМ - альбумин мочи; АУ - альбуминурия; ДТЛ - длина теломер лейкоцитов; СПВ - скорость пульсовой волны; ТКИМ - толщина комплекса интима-медиа; АСБ - наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД - эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД - эндотелиальная дисфункция. на аденин в 238 позиции. ФНО-а запускает процесс воспаления путем образования активных форм кислорода [14]. Было доказано, что терапия антагонистами ФНО-а не только уменьшает воспалительный ответ, но и приводит к снижению жесткости артериальной стенки [15]. ФНО-а влияет на экспрессию NO-синтазы и снижает биодоступность оксида азота, что вызывает развитие эндотелиальной дисфункции [16]. Также было обнаружено, что эндотелиальная дисфункция связана с альбуминурией [17], а уровень HbA^ ассоциирован с воспалением как у лиц с сахарным диабетом 2 типа, так и у людей без нарушений углеводного обмена [18]. Результаты межгруппового сравнения лиц с генотипами GG и GA полиморфизма -238G>A гена TNF представлены в табл. 2. У пациентов с GG генотипом были выявлены более низкий показатель альдостерона плазмы (р=0,021) Гены & Клетки, том XV, № 2, 2020 КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ 85 Таблица 3. Клиническая характеристика групп пациентов с СС и СТ генотипами полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 Показатель СС (n=105) СТ (n=51) Значение p Возраст (лет), M±SD 49,95±2,34 51,47±4,04 0,556 Мужчин (n, %) 38 (36,19) 15 (29,41) 0,402 ОТ/ОБ, M±SD 0,85±0,02 0,86±0,03 0,954 Ожирение (n, %) 22 (20,95) 18 (35,29) 0,054 САД (мм рт. ст.) M±SD 125,31±3,13 126,99±4,98 0,656 ДАД (мм рт. ст.) M±SD 79,51±2,01 87,08±2,92 0,579 Центральное САД (мм рт. ст.) М±SD 115,75±3,25 119,13±5,90 0,112 Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±SD 80,29±2,54 79,15±3,16 0,527 Центральное пульсовое АД (мм рт. ст.) M±SD 35,45±2,0 39,98±4,63 0,724 Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±SD 95,18±2,53 95,94±3,90 0,757 АГ (n, %) 27 (25,71) 15 (29,41) 0,625 ОХ (ммоль/л), M±SD 5,62±0,22 5,64±0,30 0,755 ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD 3,91±0,20 3,81±0,26 0,891 ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD 1,19±0,06 1,20±0,10 0,993 ТГ (ммоль/л), Me (LQ-UQ) 0,91 (0,67-1,37) 1,10 (0,78-1,46) 0,213 ГН (ммоль/л), Ме (LQ-UQ) 5,3 (5,0-5,8) 5,2 (4,8-5,75) 0,518 НвА1с (%), Me (LQ-UQ) 5,2 (5,0-5,6) 5,1 (4,9-5,4) 0,880 ИРИ (мкЕД/л), Ме (LQ-UQ) 7,35 (5,6-10,4) 7,34 (5,5-10,7) 0,682 НОМА, Ме (LQ-UQ) 1,8 (1,32-2,53) 1,76 (1,33-2,61) 0,526 ИР (n, %) 28 (27,45) 15 (30) 0,742 СД 2 (n, %) 13 (12,38) 7 (13,73) 0,813 Креатинин (мкмоль/л), М±SD 84,19±2,85 83,7±4,78 0,611 ИПФР-1 (нг/мл), Mе (LQ-UQ) 153,72±12,76 158,91±24,18 0,951 Альдостерон (пг/мл), М±SD 90,24±13,46 94,68±24,8 0,904 АМ (мг/л), Ме (LQ-UQ) 8 (5-15) 9 (5-11) 0,643 АУ (n, %) 6 (7,23) 1 (2,44) 0,277 ДТЛ, M±SD 9,84±0,09 9,79±0,1 0,188 СПВ (м/с), M±SD 8,67±0,41 8,55±0,57 0,859 СПВ > 10 м/с (n, %) 24 (22,86) 10 (19,61) 0,644 ТКИМ (мм), M±SD 0,71±0,04 0,72±0,05 0,631 ТКИМ>0,9 мм (n, %) 14 (14,29) 7 (14,89) 0,921 АСБ (n, %) 45 (45,92) 20 (42,55) 0,702 ЭЗВД (%), M±SD 10,97±0,69 10,42±1,05 0,700 ЭД (n, %) 38 (38,78) 18 (40,91) 0,810 Примечание: ОТ/ОБ - отношение окружности талии к окружности бедер; САД - систолическое артериальное давление; ДАД - диастолическое артериальное давление; АГ - артериальная гипертензия; ОХ - общий холестерин; ХС ЛПНП - холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП - холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ-триглицериды; ГН - глюкоза натощак; НвА1с - гликированный гемоглобин; ИРИ - иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА - индекс инсулинорезистентности; ИР - наличие инсулинорезистентности; СД 2 - сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 - инсулиноподобный фактор роста; АМ - альбумин мочи; АУ - альбуминурия; ДТЛ - длина теломер лейкоцитов; СПВ - скорость пульсовой волны; ТКИМ - толщина комплекса интима-медиа; АСБ - наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД - эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД - эндотелиальная дисфункция. и более высокие показатели инсулиноподобного фактора роста (р=0,032) и HbA1c (р=0,020). В литературе данные по наличию взаимосвязи полиморфизма -238G>A с ССЗ различаются. Наличие генотипов AA и GA повышало риск развития ИБС у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени, и А-аллель данного полиморфизма был ассоциирован с более высокими уровнями липопротеидов низкой плотности и триглицеридов [19]. На основании результатов мета-анализа, проведенного по данным исследований Азиатской и Европейской популяций, была показана значимая корреляция А-аллеля полиморфизма -238G>A с предрасположенностью к ишемическому инсульту [10]. По данным другого мета-анализа наличие взаимосвязи генетического полиморфизма -238G>A с ишемическим инсультом выявлено не было [20]. А-аллель данного полиморфизма снижал риск развития ИБС у некурящих [21]. Гены & Клетки, том XV, № 2, 2020 86 КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ Связь полиморфизма -15620T гена MMP9 c ^стоянием артериальной стенки и факторами риска сердечнососудистых заболеваний Ген MMP9 расположен на длинном плече 20 хромосомы в локусе 20q13.12. Полиморфизм -15620>T представляет собой однонуклеотидную замену цитозина на тимин в промоторной области гена. Матриксные металлопротеиназы являются группой ферментов, участвующих в процессах тканевого ремоделирования и деградации внеклеточного матрикса. ММП 9 влияет на процессы фиброза и воспаления и играет роль в патогенезе ССЗ [22]. У пациентов с Т-аллелем полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 отмечали более высокие уровни ММП 9 и более высокий индекс окислительного стресса [23], что могло привести к развитию ожирения [24]. Было доказано, что повышение уровня матриксных металлопротеиназ выявляется у пациентов с артериальной гипертензией [12] и ассоциировано со старением [25]. Клиническая характеристика групп пациентов с генотипами полиморфизма -1562С>Т представлена в табл. 3. Малочисленная группа с генотипом ТТ исключена из анализа. При межгрупповом сравнении генотипов СС и СТ полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 параметры артериальной стенки не отличались. Однако следует отметить, что в группе носителей генотипа СТ имелась тенденция к большей частоте встречаемости ожирения по сравнению с группой пациентов с генотипом СС (35,29% и 20,95%, соответственно, р=0,054). Наши данные согласуются с результатами работ других авторов. В исследовании M. Luizon с соавт. (2016) было показано, что Т-аллель генетического варианта -1562С>Т в сочетании с другими вариантами нуклеотидной последовательности гена MMP9 коррелирует с ожирением и влияет на повышение уровня ММП 9 у пациентов с ожирением [26]. Также была обнаружена связь между наличием Т-аллеля и ССЗ. В работе J. Rodriguez-Perez с соавт. (2016) было доказано влияние Т-аллеля и СТ генотипа на риск развития инфаркта миокарда [27]. В мета-анализе была показана ассоциация Т-аллеля у европейцев, а также связь Т-аллеля с ИБС у европеоидной и азиатской рас [28]. W. Yang с соавт. (2015) установили взаимосвязь генотипов СТ и ТТ с артериальной гипертензией [12]. В исследовании K. Buraczynska с соавт. (2015) было выявлено, что у носителей Т-аллеля риск ишемического инсульта возрастает в 1,9 раз [11]. Связь полиморфизма c.2141^ гена CYBA c ^стоянием артериальной стенки и факторами риска сердечно-сосудистых заболевания Ген CYBA расположен на длинном плече 16 хромосомы в локусе 16q24.2. Ген CYBA кодирует фермент NADPH-оксидазу, продуцирущий активные формы кислорода в клеточной стенке и усугубляющий развитие окислительного стресса. Окислительный стресс можно охарактеризовать как дисбаланс между оксидантами и антиоксидантами, которые приводят к образованию активных форм кислорода, включая свободные радикалы. Полиморфизм с214Т>С (p.Y72H) представляет собой однонуклеотидную замену тимина на цитозин в кодирующей части гена, вызывая замену тирозина на гистидин в 72 положении. Результаты межгруппового сравнения лиц с различными генотипами полиморфизма с214Т>С приведены в табл. 4. В проведенном нами исследовании у пациентов с генотипом СС и СТ параметры артериальной стенки не отличались. У пациентов с генотипом СС была отмечена меньшая длина теломер лейкоцитов, чем у пациентов с генотипом ТТ. Теломеры - это концевые участки хромосом, которые состоят из повторяющейся последовательности нуклеотидов TTAGGG и защищают линейные концы хромосом от деградации и слияния, поддерживая стабильность генома. С каждым делением клетки теломеры укорачиваются и при достижении критически низкого показателя длины теломер клетка неспособна к дальнейшему делению и наступает ее старение [29]. Длина теломер лейкоцитов отрицательно коррелирует с возрастом и развитием возраст-ассоци-ированных заболеваний [4]. Установлено, что окислительный стресс приводит к укорочению длины теломер лейкоцитов [30], в том числе у пациентов с ССЗ [31, 32]. Нами было выявлено, что С-аллель ассоциирован с более короткой длиной теломер, что может быть связано с более выраженным окислительным стрессом у пациентов с С-аллелем. Известен вклад коротких теломер и в развитие жесткости артериальной стенки: в работе Y. Ji с соавт. (2016) было обнаружено влияние генотипа СС полиморфизма с.214Т>С на жесткость артериальной стенки у здоровых людей [33]. Для выявления связи состояния артериальной стенки с полиморфизмом изучаемых генов с поправкой на факторы риска ССЗ были построены модели множественной логистической регрессии. В качестве зависимых переменных использовали параметры изменений артериальной стенки (наличие атеросклеротических бляшек, толщина комплекса интима-медиа >0,9 мм, эндотелий-зависимая вазодилатация <10%, скорость пульсовой волны >10 м/с) и связи между ними и изучаемыми генотипами выявлено не было. Были обнаружены следующие взаимосвязи: между наличием атеросклеротических бляшек и возрастом (p<0,001, ОШ: 1,141, ДИ: 1,087-1,198), наличием атеросклеротических бляшек и артериальной гипертензией (p=0,002, ОШ: 4,822, ДИ: 1,751-13,216), между толщиной комплекса интима-медиа >0,9 мм и мужским полом (p=0,022, ОШ: 4,776, ДИ: 1,257-18,145), толщиной комплекса интима-медиа >0,9 мм и возрастом (p<0,001, ОШ: 1,165, ДИ: 1,084-1,251), между скоростью пульсовой волны >10 м/с и возрастом (p=0,004, ОШ: 1,189, ДИ: 1,0561 ,339), между эндотелий-зависимой вазодилатацией и возрастом (p=0,003, ОШ: 1,058, ДИ: 1,020-1,098), эндотелий-зависимой вазодилатацией и артериальной гипертензией (p<0,001, ОШ: 4,710, ДИ: 1,983-11,185). Таким образом, была показана положительная корреляция между изменениями параметров артериальной стенки и ранее известными факторами риска, что согласуется с результатами работ других авторов [2, 34]. Заключение Выявлена ассоциация полиморфизма -238G>A гена TNF, полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 с метаболическими параметрами и полиморфизма с.214Т>С гена CYBA с длиной теломер лейкоцитов. Связи полиморфных вариантов генов TNF, MMP9, CYBA с параметрами изменений артериальной стенки обнаружить не удалось. Возможно, требуется проведение более крупных популяционных исследований с включением в анализ малочисленных генотипов. Благодарности Работа выполнена в рамках государственного задания МГУ им. М.В. Ломоносова с использованием оборудования, закупленного по Программе развития МГУ. Гены & Клетки, том XV, № 2, 2020 КЛИНИЧЕСКИЙ ОПЫТ 87 Таблица 4. Клиническая характеристика групп пациентов с ТТ, ТС и СС генотипами полиморфизма с.214Т>С гена CYBA Показатель TT (n=20) ТС (n=69) CC (n=71) Значение p Возраст (лет), M±SD 51,2±5,61 49,72±3,30 50,87±3,02 0,846 Мужчин (n, %) 6 (30) 24 (34,78) 25 (35,21) 0,951 ОТ/ОБ, M±SD 0,852±0,05 0,859±0,02 0,856±0,02 0,953 Ожирение (n, %) 4 (20) 16 (23,19) 21 (29,58) 0,391 САД (мм рт. ст.) M±SD 125,05±8,03 126,01±3,80 126,84±4,17 0,908 ДАД (мм рт. ст.) M±SD 78,65±6,06 79,71±2,28 79,04±2,49 0,898 Центральное САД (мм рт. ст.) Мед. (Нкв-Вкв) 115,5 (103,5-129,5) 115 (104-128,5) 119 (101-129) 0,983 Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±SD 78,6±4,67 79,39±2,54 80,71±2,96 0,694 Центральное пульсовое АД, (мм рт. ст.) M±SD 37,5±4,14 37,09±3,11 36,98±3,32 0,988 Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±SD 94,35±5,22 94,97±2,91 96,25±3,49 0,791 АГ (n, %) 5 (25) 20 (28,99) 19 (26,76) 0,768 ОХ (ммоль/л), M±SD 5,27±0,33 5,64±0,27 5,64±0,26 0,396 ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD 3,50±0,34 3,85±0,26 3,94±0,24 0,242 ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD 1,15±0,15 1,21±0,07 1,20±0,08 0,811 ТГ (ммоль/л), Me (LQ-UQ) 1,06 (0,73-1,90) 1,01 (0,67-1,5) 0,89 (0,72-1,26) 0,565 ГН (ммоль/л), M±SD 5,43±0,51 5,64±0,27 5,57±0,26 0,765 НвА1с (%), Me (LQ-UQ) 5,2 (5,1-5,9) 5,15 (5,0-5,6) 5,2 (4,9-5,4) 0,566 ИРИ (мкЕД/л), Мe (LQ-UQ) 7,55 (5,6-9,9) 8,3 (5,9-11,6) 6,9 (5,0-9,5) 0,166 НОМА, Ме (LQ-UQ) 2,00 (1,29-2,53) 1,87 (1,38-2,93) 1,72 (1,20-2,51) 0,331 ИР (n, %) 5 (25) 21 (31,82) 18 (25,71) 0,432 СД 2 (n, %) 3 (15) 9 (13,04) 9 (12,68) 0,945 Креатинин (мкмоль/л), М±SD 85,05±6,81 84,37±4,11 83,61±3,25 0,92 ИПФР-1 (нг/мл), M±SD 170,96±55,96 154,70±15,50 151,44±14,81 0,593 Альдостерон (пг/мл), М±SD 83,41±36,17 90,97±18,87 93,97±16,65 0,858 АМ (мг/л), Ме (LQ-UQ) 11,0 (5,0-20,5) 8,0 (4,0-14,0) 8,3 (6,0-12,5) 0,892 АУ (n, %) 0 (0) 1 (1,85) 6 (10,17) 0,067 ДТЛ, M±SD 10,10±0,37 9,79±0,08 9,77±0,08 0,011 СПВ (м/с), M±SD 8,38±1,03 8,63±0,52 8,64±0,45 0,875 СПВ>10 м/с (n, %) 4 (20) 17 (24,64) 13 (18,31) 0,361 ТКИМ (мм), M±SD 0,72±0,09 0,70±0,05 0,72±0,04 0,782 ТКИМ>0,9 мм (n, %) 4 (22,22) 9 (14,29) 9 (13,24) 0,861 АСБ (n, %) 6 (33,33) 27 (42,86) 34 (50) 0,413 ЭЗВД (%), M±SD 11,06±1,34 10,45±0,80 10,97±0,97 0,656 ЭД (n, %) 7 (38,89) 24 (38,71) 27 (40,91) 0,799 Примечание: ОТ/ОБ - отношение окружности талии к окружности бедер; САД - систолическое артериальное давление; ДАД - диастолическое артериальное давление; АГ - артериальная гипертензия; ОХ - общий холестерин; ХС ЛПНП - холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП - холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ-триглицериды; ГН - глюкоза натощак; НвА1с - гликированный гемоглобин; ИРИ - иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА - индекс инсулинорезистентности; ИР - наличие инсулинорезистентности; СД 2 - сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 - инсулиноподобный фактор роста; АМ - альбумин мочи; АУ - альбуминурия; ДТЛ - длина теломер лейкоцитов; СПВ - скорость пульсовой волны; ТКИМ - толщина комплекса интима-медиа; АСБ - наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД - эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД - эндотелиальная дисфункция.

About the authors

A. A Akopyan

Medical Scientific and Educational Center of M.V. Lomonosov Moscow State University; Russian Clinical and Research Center of Gerontology N.I. Pirogov Russian National Research Medical University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Moscow, Russia

K. I Kirillova

Medical Scientific and Educational Center of M.V. Lomonosov Moscow State University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Moscow, Russia

I. D Strazhesko

Russian Clinical and Research Center of Gerontology N.I. Pirogov Russian National Research Medical University; Russian Clinical and Research Center of Gerontology N.I. Pirogov Russian National Research Medical University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Moscow, Russia

L. M Samokhodskaya

Medical Scientific and Educational Center of M.V. Lomonosov Moscow State University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Moscow, Russia

S. L Leonov

I.I. Polzunov Altai State Technical University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Barnaul, Russia

E. M Gelfand

I.I. Polzunov Altai State Technical University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Barnaul, Russia

A. G Sorokina

Medical Scientific and Educational Center of M.V. Lomonosov Moscow State University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Moscow, Russia

I. A Orlova

Medical Scientific and Educational Center of M.V. Lomonosov Moscow State University

Email: a.alexandrova18@gmail.com
Moscow, Russia

References

Supplementary files