OTsENKA REGENERATsII SKELETNOY MYShEChNOY TKANI U MYShEY LINII BLA/J POSLE TRANSDUKTsII REKOMBINANTNYM ADENOVIRUSOM AD5-DYSF

Full Text

ВВЕДЕНИЕ. Одним из белков, участвующих в процессах регенерации мышечных волокон (МВ), является дисферлин, кодируемый геном DYSF. Мутации в гене приводят к неспособности МВ адекватно реагировать на повреждение сарколеммы, что в дальнейшем приводит в атрофии и некрозу мышц. У человека снижение или отсутствие экспрессии DYSF приводит к развитию поясно-конечностных мышечных дистрофий 2B, также именуемых дисфер-линопатии. Данная группа заболеваний сопровождается прогрессирующей слабостью и атрофией мышц с раннего возраста. С целью изучения процессов, протекающих при дисферлинопатиях, существует несколько десятков линий мышей, несущих мутацию в DYSF, одной из которых является Bla/J. ЦЕЛЬ. Оценка влияния рекомбинантного аденовируса Ad5-Dysf на состояние скелетных мышц у мышей, несущий мутацию в гене DYSF. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. Мыши линии Bla/J ре-троорбитально произведена инъекция 100 мкл 6,5х108 БОЕ рекомбинантного аденовируса Ad5-Dysf. На 30 сут. после трансдукции был произведен забор мышц голени. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином, по Маллори, проводили им-муногистохимический анализ с антителами к a-SMA, Ki67 и myogenin. В качестве контроля выступала мышь Bla/J того же возраста. РЕЗУЛЬТАТЫ. Средняя площадь поперечного сечения мышечных волокон (МВ) в мышце экспериментальной группы была выше (747,5±408,6 дт2 и 515,3±300,8 дт2 у контроля, p = 0,000002), что отражает вызванную трансдукцией гипертрофию МВ. Содержание некротизированных мышечных волокон в экспериментальной группе было несколько выше (14,4±4,0% и 11,6±2,9%, p = 0,04), так же, как и доля центральноядерных МВ (21,2±7,0% и 18,9±5,6%, соответственно). Доля Ki-67-позитивных ядер в интерстиции была больше после трансдукции Ad5-Dysf (35,1 ±17,2% и 8,57±18,3%, p = 0,0001), в то время как содержание соединительной ткани было ниже (18,1 ±4,9% и 25,7±7,1%, p = 0,04), что свидетельствует о меньшем замещении соединительной тканью мышцы у экспериментальной мыши. Отношение числа сосудов к числу МВ у обоих животных было примерно равным (0,23±0,03 и 0,23±0,06 у контроля). Процент миогенин-позитивных ядер был выше после введения Ad5-Dysf (28,3±6,5% и 15,8±5,7, p = 0,000031), а Ki-67-позитивных ядер, наоборот, ниже (20, 0±5, 2% и 27, 5 ±6, 7%, p = 0, 01 3 ) , что позволяет сделать вывод о большей степени диф-ференцировки и более завершенном рабдомиогене-зе после инъекции. ВЫВОД. Предварительные данные показывают, что системное введение Ad5-Dysf усиливает активность рабдомиогенеза in vivo и может быть использовано в качестве потенциальной генной терапии дисферлинопатий. Для более достоверных результатов планируется продолжение эксперимента с введением в него большего числа линейных животных, а также с мышами линии C57Bl/6.

About the authors

O. N Chernova

Email: olgachernova92@yandex.ru

M. O Mavlikeev

I. A Yakovlev

V. V Solov'eva

I. G Starostina

A. A Titova

A. K Zeynalova

M. S Kaligin

A. A Rizvanov

A. P Kiyasov

R. V Deev

References

Supplementary files