Lokalizatsiya ekspressiruyushchikh nestin kletok v zhirovoy tkani i ikh kharakteristika

Abstract

Full Text

Нестин - один из маркеров клеток - потомков нервного гребня, которые сохраняются в тканях взрослого организма в качестве стволовых и участвуют в регенерации тканей. Локализация и функции этих клеток в жировой ткани, а также их роль в регенерации не исследованы. Целью работы было охарактеризовать нестин-экспрессирующие клетки жировой ткани in vivo и in vitro с точки зрения их стволовости и гормональной регуляции. В работе были использованы мыши, у которых под нестино-вым промотором экспрессируется флуоресцентный зеленый белок GFP. Таким образом, весь пул не-стин-экспрессирующих клеток в жировой ткани можно было проследить in vivo и in vitro. На тотальных препаратах и толстых срезах жировой ткани мыши окрашенных антителами против CD31 (маркер эндотелия), NG2, aSMA и PDGFRb обнаружены группы, цепочки и единичные нестин-экспрессирующие клетки локализованные как периэндотелиально, так и в строме между зрелыми адипоцитами. В тоталь ной популяции МСК (мезенхимных стволовых/стро-мальных клеток), выделенных из жировой ткани по стандартному протоколу, доля нестин-экспрессирую-щих клеток составляет 5-10% и незначительно сокращается ко 2-3 пассажу. В составе гетерогенной популяции МСК нестин-экспрессирующие клетки способны пролиферировать и мигрировать «в экспериментальную рану». Отсортированные нестин-экспрессирующие клетки способны давать клоны и дифференцироваться в адипогенном, остео- и хон-дрогенном направлениях. Иммуноцитохимический анализ выявил экспрессию маркеров, характерных для мышиных мезенхимных стромальных и стволовых клеток. Таким образом, нестин-экспрессирую-щие клетки обладают характеристиками стволовых. Ранее мы показали способность отдельных клеток в составе гетерогенной популяции МСК отвечать на гормоны (Kotova et al., 2014) и обнаружили тран-зиторное увеличение чувствительности отдельных клеток в ответ на действие катехоламинов (Tyurin-Kuzmin et al., 2016). Была высказана гипотеза, что именно стволовые клетки в составе гетерогенной популяции МСК обладают способностью усиления чувствительности в ответ на действие гормона, однако анализ ответа нестин-экспрессирующих клеток на катехоламины не выявил в них повышения внутриклеточного Са2 + . Можно предположить, что исследуемая популяция нестин-позитивных клеток задействует другой механизм внутриклеточной передачи сигнала в ответ на действие гормонов.