Razrabotka kletochno-inzhenernoy fastsii tazovogo dna na osnove autologichnykh kletok i biosovmestimykh materialov dlya khirurgicheskogo lecheniya prolapsa genitaliy

Full Text

АКТУАЛЬНОСТЬ. В лечении тазового пролапса на сегодняшний день основным методом является хирургическое вмешательство.Наиболее низкий процент рецидивов во время операции пластики промежности наблюдается при использовании сетчатых имплантатов (5-40%), однако, имеются mesh-ассоциированные осложнения (2-10%). Учитывая данную тенденцию, возрос интерес к усовершенствованию применяемых имплантатов путем создания на их поверхности слоя аутологичных клеток in vitro для восстановления фасциальных дефектов тазового дна. ЦЕЛЬ. Изучить биосовместимость клеточно-инженерных конструкций на основе биодеградируемых и бионедеградируемых матриксов с аутологичным клеточным компонентом (ДФ) при имплантации крысам Вистар. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. В качестве матриксов КИК использовали образцы изделий размерами 10x10 мм из сетки ProleneMesh (полипропилен, ETHICON), Випро II (композит из полилактоглико-лида с полипропиленом, ETHICON), икриловую сетку VM94 (полилактогликолид, ETHICON), биологический имплантат Permacol (свиной дермальный коллаген, Sofradim) и титановую сетку (ООО НПФ «Темп»). Клеточный компонент конструкции состоял из аутологичных фибробластов (2-3 пассажи) крыс Вистар, выделенных из фрагментов кожи размером 5x5 мм, культивированных в стандартных условиях и посеянных в концентрации 4x105 клеток на каждый образец каркаса. Клеточный монослой формировался на каркасах в течение 2-3 нед. Динамика формирования КИК подтверждалась при помощи световой микроскопии (NikonTE-2000U). Жизнеспособность полученных конструкций оценивалась с использованием лазерного сканирующего конфокального микроскопа LSM-710 (CarlZeiss) с окраской LIVE/DEAD. Имплантации конструкций животным проводили в условиях операционной центрального вивария Сеченовского университета. Крысам Вистар (n = 12) в фасциальное пространство межлопаточной области в сформированные карманы устанавливалось по 4 КИК. Контролем служили каркасы без клеток у 4 крыс. Сроки контроля - 7, 14, 21 сут. Проведено гистологическое (гематоксилин + эозин) и ИГХ (Coll3a, Casp9, Casp3, CD31, Bcl2, CD31) имплантированных КИК. Результаты. Получены 5 различных типов КИК в условиях in vitro, в которых клеточный компонент был представлен аутологичными ДФ (жизнеспособ-ноть - 84-95%). Вначале происходило покрытие нитей сеток, далее - закрытие ячеек сетки (поры 0.5x0.5 мм), формируя многослойное клеточное Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине 239 покрытие. На матриксе Permacol отмечалось равномерное покрытие ДФ с частичным проникновением внутрь материала. Наиболее цитосовместимым каркасом по оценке динамики формирования клеточного компонента был Permacol. Тканевая реакция на посаженных контрольных сетках и КИК была различной. При образовании клеточного монослоя отмечалась менее выраженная воспалительная реакция (конструкции проращены соединительной тканью, макрофаги и гигантские клетки немногочисленны) и формировалась зрелая соединительная ткань. РЕЗУЛЬТАТЫ. ИГХ находятся в процессе морфометрической оценки. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Оценка предварительных результатов показала, что in vitro возможно создание различных КИК фасции с многослойным жизнеспособным клеточным компонентом, каркасом для которых являются имплантаты, применяемые в гинекологии. Данные конструкции пригодны для имплантации, не вызывают отторжения и формируют in vivo более зрелую соединительную ткань - основной функциональный компонент фасции.

About the authors

Ya. Yu Sulina

Email: ya.suli.na@gmail.com

A. V Lyundup

A. I Ishchenko

L. S Aleksandrov

V. P Baklaushev

A. A Pashchenko

A. G Demchenko

L. K Abdullaev

I. D Klabukov

Yu. S Lyashenko

M. E Krasheninnikov

References

Supplementary files