Full Text
Цель настоящей работы заключалась в изучении роли взаимодействия репрессорных комплексов PRC1 и PRC2 в механизме жировой дифференцировки (ЖД) мышиных мезенхимных стволовых клеток (МСК) линии С3Ж0^/2 (10T1/2). Путём стабильной экспрессии ретровирусного вектора shBMI1.puro мы получили культуру клеток 10T1/2, конститутивно продуцирующих высокий уровень Gfp и низкий уровень продукта гена BMI1. Используя указанные культуры, мы оценили в ходе индукции ЖД формирование адипоцитов, уровень экспрессии и продукции BMI1 andEZH2 - основных компонентов, соответственно, комплексов PRC1 и PRC2, и их взаимодействие с промоторами PPARy2 и RUNX2 -ключевых регуляторных генов жировой и костной дифференцировки. Мы показали, что репрессия BMI1 замедляла и снижала, но не отменяла ЖД. В недифференцированных клетках промоторы генов PPARy2 и RUNX2 аккумулировали высокий уровень белков Bmi1, Ezh2 и низкий уровень Utx, специфически деметилирующей Н3К27ме3 и формирующей вместе с Ezh2 эпигенетический переключатель, регу Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине 201 лирующий образование активного хроматина. В ходе ЖД взаимодействие Bmi1, Ezh2 andlltx изменялось на противоположное с промотором гена PPARy2, но не изменялось с промотором гена RUNX2. Важно отметить, что продукт гена ретинобластомы (pRb) и его партнёр белок р130 аккумулировались в адипоцитах в ходе ЖД, однако, высокий уровень р130 на промоторе PPARy2 выявлялся в недифференцированных клетках, но снижался в ходе ЖД, что свидетельствует о супрессорной роли р130 в регуляции экспрессии PPARy2. Наши результаты дают возможность предположить, что взаимодействие PRC1 и PRC2 необходимо для эффективной экспрессии основных регуляторных генов ЖД. Однако, фенотипически ЖД формируется с участием других факторов, которые могут компенсировать снижение уровня продукции Bmi1 и PPARy2. Наши результаты также показывают, что в ходе ЖД в мышиных МСК происходит снижение уровня и активности Ezh2, что отличает их от МСК человека.
