NORMALIZATsIYa UROVNYa RNK V KROVI ZhIVOTNYKh PRI POVREZhDENII MIOKARDA S POMOShch'Yu RIBONUKLEAZY BINAZY

Abstract

Full Text

При ишемии/реперфузии происходит выброс РНК из поврежденных клеток миокарда в кровеносное русло. Такие внеклеточные РНК (внРНК) индуцируют выброс целого ряда провоспалительных цитокинов, что приводит к миграции лейкоцитов в зону поражения, развитию отека тканей в результате увеличения проницаемости сосудов и тромбообразованию, поскольку РНК выступает в роли прокоагулянта. Показано, что использование рибонуклеаз млекопитающих семейства РНКазы А, разрушающих внРНК, ускоряет в животных восстановление функции сердца и снижает воспаление ткани миокарда и сосудов после операций на сердце и инфаркта миокарда. Мы предположили, что РНКаза биназа из Bacilluspumilis будет эффективным инструментом для восстановления функции сердца. Мы показали, что в отличие от РНКазы А и ее гомологов биназа не ингибируется ингибитором РНКаз млекопитающих и ее активность не меняется в присутствии восстановительных агентов. Это показывает, что биназа не чувствительна к изменению редокс условий, по-видимому, из-за отсутствия остатков цистеина и метионина, что показывает ее перспективность для сочетанной терапии с восстановительными агентами при ишемии/реперфузии. Внутрибрюшинное введение биназы мышам в дозе до 5 мг/кг не вызывает выраженного иммунного ответа и токсического действия. В качестве модели повреждения миокарда для исследования кардиопротекторного действия биназы использовалось двукратное введение синтетического кате-холамина-изопротеренола бодрствующим крысам. В этой модели часть кардиомиоцитов гибнет и в течение 3-4-х нед. замещается соединительной тканью, что характерно для хронической ишемии миокарда. Было определено изменение уровня РНК в крови животных на протяжении 7 дней после первого введения катехоламина-изопротеренола. Биназу начинали применять одновременно со вторым введением катехоламина-изопротеренола, которое вызы Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине 163 вает развитие повреждения ткани миокарда. Биназу вводили животным каждые 24 ч. в концентрации 50 мкг/кг. Уровень биназы в крови животных оценивали по ее специфической РНКазной активности. Применение биназы достоверно снижало уровень РНК в крови животных с повреждением миокарда, что должно способствовать повышению его регенеративного потенциала. В дальнейшем, для доказательства протекторного действия биназы, будет оценено ее влияние на размер зоны повреждения миокарда, уровень противовоспалительных цитоки-нов и различных биомаркеров инфаркта миокарда в крови животных. Препарат на основе биназы, в случае доказательства его эффективности для восстановления функции сердца, может быть использован для предотвращения развития патологических процессов и осложнений во время операций на сердце, сопровождающихся ишемией/реперфузией, что приводит к значительным повреждениям кардиомиоцитов, а также при инфаркте миокарда и кардиоваскулярных тромбообразованиях.