FARMAKOLOGIChESKAYa MODULYaTsIYa VOSPALITEL'NOGO STATUSA MAKROFAGOV I IKh PARAKRINNOGO VOZDEYSTVIYa NA ChUVSTVITEL'NOST' ADIPOTsITOV K INSULINU

Abstract

Full Text

Способность макрофагов к формированию про-воспалительного (М1) или противовоспалительного (М2) фенотипа характеризует их фенотипическую пластичность и является условием нормального развития воспаления. Нарушение этого механизма приводит к латентному воспалению, - одной из причин атеросклероза, метаболического синдрома и диабета 2-го типа. Коррекция этих нарушений может быть связана с применением средств, воздействующих на воспалительный клеточный сигналинг. В настоящей работе изучено влияние антивоспалительных агентов, - активаторов НАД-зависимых деацетилаз (сиртуинов) и лиганда ядерных рецепторов PPARy на поляризацию макрофагов и их способность регулировать инсулиновую чувствительность адипоцитов. В качестве клеточной модели использовали макрофаги линии RAW264.7, поляризованные по М1-типу в присутствии бактериального липополисахарида и интерферона-у, и по М2-типу в присутствии интерлейкина-4. Макрофаги М1 имели повышенную экспрессию TNFa, CXCR9 и CCR7 и секрецию цитокина Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 162 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине CXCL11, а также генерировали активные формы кислорода, с преобладанием фенотипа, имеющего дендритоподобную форму. В макрофагах М2 выявлена достоверно более высокая, чем в М1, экспрессия факторов IGF1, ALOX15, а также маннозного рецептора CD206. Активаторы сиртуинов ресвератрол и DCHC (3-(2,4-дихлорофенил)-7-гидрокси-4-хромен- 4-он) и активатор PPARy розиглитазон вызывали снижение экспрессии воспалительных маркеров TNFa, CXCL9 и повышали экспрессию IGF1 и ALOX15. Ингибиторы SIRT1 сиртинол и Ex527 не оказывали достоверных эффектов на экспрессию маркеров в М1 и М2 макрофагах. Ингибитор SIRT1, соединение Ex527 (6-хлоро-2,3,4,9-тетрагидро-1 Н-карбазол-1-карбоксамид) повышало долю дендритоподобных клеток в М0, М1 и М2-популяциях макрофагов. Кратковременное воздействие инсулина на адипо-циты, полученные из мышиных фибробластов 3T3L1 по методу Zebisch et.al. 2012, вызывало усиление фосфорилирования киназы Akt по Thr308 и Ser473. Кондиционированная среда М1-клеток вызывала снижение уровня pAktThr308 и повышала уровень pAktSer473 в 3T3L1 адипоцитах. Эти эффекты не выявлялись в присутствии кондиционированных сред М2-макрофагов, а также макрофагов М1, культивированных в присутствии активатора SIRT1, DCHC, и розиглитазона. Напротив, кондиционированная среда М2 макрофагов, а также среда М1 макрофагов, обработанных DCHC, индуцировала повышение уровня фосфорилирования сайта AktThr308 и снижала уровень pAktSer473. Полученные данные свидетельствуют о том, что использование SIRT1 и рецепторов PPAR в качестве терапевтических мишеней для оптимизации регенеративных процессов и смягчения процессов латентного воспаления представляет интерес в сочетании с изучением внутриклеточных сигнальных процессов.