Plyuripotentnye stvolovye kletki kak istochnik kletok pigmentnogo epiteliya setchatki glaza

Abstract

Full Text

Дегенерация макулы - заболевание, широко распространенное во всем мире. Десятки миллионов людей страдают от возрастной макулодегенерации, есть и наследственные формы. Поиск надежных источников для трансплантации компонентов сетчатки, (в частности, пигментного эпителия) является чрезвычайно важной проблемой. Плюрипотентные стволовые клетки человека (эмбриональные стволовые клетки, ЭСК и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, иПСК) способны самообновляться и дифференцироваться во все типы соматических клеток. Это делает их ценным источником дифференцированных клеток для заместительной терапии. Клинические испытания пигментного эпителия сетчатки (RPE), дифференцированного из плюрипотентных стволовых клеток, начаты в Соединенных Штатах и Японии. Пионерские клинические испытания выявили необходимость оптимизации методов диф-ференцировки RPE для стандартизации материала для будущей клеточной терапии. Для эффективного лечения RPE должен повторить физиологию естественного RPE человека. Более того, возможно, что доставка клеток в виде суспензии не является оптимальной для будущей терапии,и необходима разработка соответствующих подложек для доставки клеток к месту повреждения. Мембрана Бруха - важная структура глаза, которая обеспечивает поддержку для создания неповрежденного и функционального слоя RPE. Мы разработали надежный протокол дифференцировки и экспансии RPE из неинтеграционных иПСК от здоровых доноров. Полученные клетки RPE экспрессируют маркеры пигментного эпителия, имеют соответствующий трансэпителиальный потенциал и способность к фагоцитозу. Для получения высокополяризованного зрелого RPE мы подготовили методом электроспиннинга набор по ристых нановолоконных подложек из различных материалов, чтобы имитировать мембрану Бруха. Мы протестировали способность мембран поддерживать созревание и поляризацию пигментного эпителия сетчатки, дифференцированного из иПСК. Клетки RPE, культивированные на модифицированном полиуретане, показали хорошую адгезию, гексагональную морфологию клеток, плотные контакты, способность к накоплению пигмента и фагоцитозу.