Izmenenie adipogennogo potentsiala mezenkhimnykh stromal'nykh kletok zhirovoy tkani cheloveka pri insulinorezistentnosti

Abstract

Full Text

На настоящий момент в литературе описано снижение пролиферативного потенциала и изменение биологических свойств мезенхимных стромальных клеток (МСК) при хронических заболеваниях. Однако недостаточно охарактеризованы особенности изменения МСК при метаболических и эндокринных нарушениях, в частности таких, как инсулинорези-стентность (ИР), которая является важным фактором в патогенезе сахарного диабета 2 типа (СД2) и его связи с ожирением. По данным многих научных исследований функциональная активность МСК, выделенных из жировой ткани и костного мозга пациентов с длительным течением СД2 и плохо контролируемыми показателями гликемии, значительно снижена. В нашей лаборатории было обнаружено, что количество циркулирующих прогениторных клеток в периферической крови больных ишемической болезнью сердца, сочетающейся с СД2, коррелирует с уровнем гипергликемии и степенью декомпенсации Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине 141 нарушений углеводного обмена. Кроме того, при культивировании МСК в условиях высокой концентрации глюкозы (25 мМ) изменяется уровень экспрессии генов факторов, регулирующих ангиогенез, снижается способность МСК стимулировать рост новых сосудов. Таким образом, более подробное изучение особенностей влияния ИР на адипогенную диффе-ренцировку МСК позволит лучше понять патогенез прогрессирования СД2 и роль МСК в этом процессе. Целью настоящей работы является изучение адипо-генного потенциала МСК жировой ткани, полученных от пациентов с ИР. Степень ИР у пациентов оценивалась методом гиперинсулинемического-эугликеми-ческого клэмпа. МСК, выделенные по стандартному протоколу, подвергались дифференцировке в адипо-генном направлении. ИР МСК была подтверждена снижением фосфорилирования протеинкиназы Б в ответ на стимуляцию инсулином. Оценка эффективности дифференцировки проводилась в динамике с помощью методов ПЦР в реальном времени по генетическим маркерам (PPARG, C/EBPb, Adiponectin) и морфологического окрашивания липидных капель (OilRedO). В результате нами было показано, что ИР значительно изменяет дифференцировочный потенциал МСК в адипогенном направлении. При цитохимическом окрашивании в формирующихся ади-поцитах из МСК, полученных от здоровых доноров, наблюдается равномерное распределение мелких липидных капель в большинстве клеток, в отличие от адипоцитов, полученных от доноров с ИР, которые формируют кластеры клеток с крупными липидными каплями, окруженные недифференцированными клетками, лишенными липидных включений. В то же время, данные ПЦР демонстрируют значительно более высокую экспрессию адипогенных факторов в МСК от пациентов с ИР. Полученные результаты позволяют предположить, что при развитии инсулиновой резистентности происходит снижение адипо-генного потенциала МСК, сопряженное с усилением накопления липидных капель в дифференцирующихся клетках.