Epidermal'nyy kletochnyy produkt na razlichnykh nositelyakh dlya prakticheskoy meditsiny

Abstract

Full Text

Значительные успехи в области экспериментальной эмбриологии, цитологии, молекулярной генетики и генной инженерии привели к формированию новой области биомедицины - регенеративной медицины. Регенеративная медицина является ярким примером стирания граней между фундаментальными и прикладными исследованиями, взаимодействия различных научных дисциплин, определяющую роль данного медицинского направления играет биологическая база исследований. Трансплантируемые клеточные суспензии или агрегаты самостоятельно встраиваются в трехмерную структуру исходной ткани и интегрируются с окружающей тканью. В связи с этим крайне актуальным является: создание молекулярно-клеточных продуктов для развития технологий заместительной регенеративной терапии, токсикологических исследований и доклинических испытаний после воздействия на организм повреждающих факторов различного генеза (радиологического, химического, физического и т.д.), а также применение клеточных продуктов в практике медицинских учреждений. На базе Научно-исследовательского центра фундаментальных и прикладных проблем биоэкологии и биотехнологии (НИЦ ФППББ) ФГБОУ ВПО «УлГПУ им. И.Н. Ульянова» началась работа по созданию молекулярно-клеточных продуктов для развития технологий заместительной регенеративной терапии. На сегодняшний день получен первый клеточный продукт, который в ближайшее время может быть использован в качестве клеточной терапии в образовании грануляционной ткани, которая является основой для эпителизации раны кожного покрова. Источником фибробластов являлись дермальные биоптаты кожи человека. После забора материал сразу помещали в транспортную среду, в которой биоптат находился сутки при температуре 24°С. В лаборатории Клеточных технологий НИЦ ФППББ УлГПУ дермальные био-птаты механически измельчались, инкубировались с раствором коллагеназы I типа. Далее клеточный материал пересаживали в полную среду инкубации, сбалансированную для культивирования фибро-бластов и кератиноцитов. Дальнейшее культивирование осуществлялось на трех типах носителей - коллагеновая матрица, для заживления поверхностных обширных ран; микроносители Cytodex 3; вставки мембранные с коллагеновым покрытием CorningTranswell-COL. Клеточный продукт на трех носителях применяется для заживления ран на животных в рамках прохождения доклинических испытаний. Проведено HLA-генотипирование с использованием набора Micro SSPGeneric HLA Class I&II (ABDR) (OneLambda) на определение гистосовместимости тканей. ПЦР-анализ кондиционированной клетками среды - определение вирусных и мико-плазменных контаминантов и простейших. Использовались праймеры к 25 возбудителям.