SRAVNITEL'NYY ANALIZ EKSPERIMENTAL'NYKh OPUKhOLEY, PROISKhODYaShchIKh IZ ESK I IPSK ChELOVEKA (PO REZUL'TATAM TERATOMNOGO TESTA)

Abstract

Full Text

Формирование экспериментальных опухолей («тератомный тест») до сих пор является единственным способом проверки in vivo плюрипотентности новых линий ЭСК и ИПСК человека. В данном исследовании выполнен сравнительный анализ 47 экспериментальных опухолей, которые были получены в результате тератомного теста, проведенного для ИПСК (5 линий, 38 автономных опухолей) и ЭСК (2 линии, 9 автономных опухолей) человека. Все опухоли получены по стандартному протоколу, в мышах линии SCID, на фоне генетически-обусловленно-го врожденного иммунодефицита, методом глубокой внутримышечной (левая голень) или подкожной (область загривка) инъекции суспензии стволовых клеток. Три линии ИПСК (iSMA6L, m3SMA6 и iSMA37) сформировали опухоли вне зависимости от места инъекции. Две линии ИПСК (iSMA40 и m34Sk10) дали опухоли только при подкожной инъекции. Анализ макро-морфологии опухолей показал, что при подкожных инъекциях СК формируются только компактные инкапсулированные формы и достоверно чаще образуются кластеры пространственно разделенных автономных опухолевых узлов (до 4 шт). Внутримышечные опухоли более вариабельны по своей макроструктуре и морфологии. Они не имели капсулы и глубоко инвазировали в подлежащие ткани опорно-двигательной системы. Гистологический анализ показал, что распределение опухолей по разнообразию диагностических морфотипов имеет выраженную линейную специфику. Разнообразные дериваты зародышевых листков встречаются во всех ИПСК- и ЭСК-происходящих опухолях. Только опухоли, полученные подкожной инъекцией суспензии клеток линии m34Sk10, не являются тератомами. Это инкапсулированные доброкачественные липомы с редкими фиброзными тяжами. В данном эксперименте выявлен ряд специфических признаков, по которым ЭСК и ИПСК-происходящие опухоли достоверно отличаются. 1. В ЭСК-происходящих опухолях обнаружено меньше основных диагностических клеточных морфотипов, иллюстрирующих спектр диф-ференцировки зародышевых листков. Так опухоли, происходящие из ЭСК линии HuESF9-GFP, оказались самыми бедными по спектру дифференцировки. Опухоли, происходящие из ИПСК линии iSMA40, - самыми богатыми (среднее число диагностических морфотипов - 6 + 0,7 и 13 + 0,6 соответственно). 2. В ИПСК-происходящих опухолях часто встречаются обширные участки злокачественной природы. Среднее число злокачественных морфотипов, диагностируемое по образцам ИПСК-и ЭСК-происходящих опухолей, составляет 3 + 0,6 и 0,2 + 0,2 соответственно. 3. В ЭСК-происходящих опухолях практически полностью отсутствуют трофо-бластические производные. В ИПСК-происходящих Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине 117 опухолях число диагностируемых экстраэмбриональ-ных морфотипов колеблется от 2 до 5. 4. Многофакторный статистический анализ (МШ, МГК и ДА), проведенный по матрице из 83 признаков и 135 независимых образцов, подтвердил достаточно сильные различия ЭСК- и ИПСК-происходящих опухолей в пространстве первых трех координат.