RAZRABOTKA METODIKI DLYa SOZDANIYa ISKUSSTVENNOGO SOSUDA MALOGO DIAMETRA NA OSNOVE POLIMERNOGO SKAFFOLDA I STROMAL'NYKh KLETOK KOSTNOGO MOZGA

Abstract

Full Text

ВВЕДЕНИЕ. Главной причиной инвалидизации и смертности населения в развитых странах мира, по данным ВОЗ, являются заболевания сердечно-сосудистой системы. При этом ишемия органов и тканей -главный патофизиологический механизм. Основным способом лечения сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с облитерацией кровеносных сосудов, являются шунтирующие операции. В качестве шунтов используют аутовены или аутоартерии. Однако при отсутствии собственных необходимых вен или артерий в результате проведения повторных операций или сопутствующей патологии сосудов в 30% случаев приводит к необходимости использования альтернативных сосудистых протезов. Несмотря на экономическую доступность и удобство в применении, синтетические и биологические протезы диаметром менее 6 мм не могут быть использованы в качестве шунтов, так как существует высокий риск их быстрой облитерации в результате обширной гиперплазии неоинтимы или тромбообразования. Таким образом, существует острая необходимость разработки альтернативных протезов малого диаметра (<6 мм). ЦЕЛЬ. Создание искусственного биодеградиру-емого сосуда малого диаметра в условиях in vitro, заселенного мезенхимальными стромальными клетками (МСК) костного мозга. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. В качестве материала для создания сосуда использовался полимер молочной кислоты - поли L^-лактид, который обладает рядом свойств, необходимых для использования в регенеративной медицине: отсутствие токсичности, механическая прочность, биодеградация и др. Было приготовлено два варианта каркасов с различной толщиной стенки. В приготовленные сосуды вносили суспензию МСК. В условиях СО2-инкубатора сосуды оставляли на 3 ч. с целью создания условий для максимальной адгезии клеток, затем добавляли питательную среду (статический способ посева кле ток). Подобную процедуру повторяли 3-кратно. После 7 дней культивирования с помощью криотома были сделаны криосрезы сосудов толщиной в 15-20 мкн и выполнена оценка присутствия и состояния клеток, окрашенных DAPI (4,6-диамидино-2-фенилиндол дигидрохлорид), с помощью конфокального микроскопа (LeicaTCSSP5). РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ. В обоих исследуемых вариантах клетки адгезировали на стенки сосудов и образовывали плотный монослой. В настоящее время проводятся исследования по оценке физикомеханических свойств приготовленных сосудов, а также разработка динамического способа заселения клеток и последующая имплантация наиболее оптимального варианта сосуда на модели лабораторных животных (крысы).