Ispol'zovanie bakterial'nogo agonista retseptora faktora rosta gepatotsitov dlya uskoreniya regeneratsii pecheni pri ostrom toksicheskom gepatoze

Abstract

Full Text

Острый гепатоз (острая токсическая дистрофия печени) чаще всего является следствием тяжелых токсических отравлений, в том числе, алкоголем. Начало заболевания сопровождается увеличением печени и нарушением ее функций, при прогрессировании болезни происходит развитие тяжелой печеночной недостаточности. В тяжелых случаях возможен летальный исход, а в более легких случаях заболевание переходит в хроническую форму. Регенерация печени при остром гепатозе координируется набором факторов роста, среди которых центральную роль играет фактор роста гепатоцитов (HGF). Рецептор фактора роста гепатоцитов (HGFR) контролирует пролиферацию и подвижность гепатоцитов, а также клеток эндотелия и ряда эпителиальных клеток. Терапевтическое использование рекомбинантного HGF затруднено вследствие необходимости посттрансляционной модификации белка и малой биодоступности. Фактор инвазии бактерии Listeria monocytogenes InlB специфически связывается с HGFR через LRR-домен, приводя к активации рецептора. Целью работы была оценка возможности использования InlB для регенерации печени при экспериментальном остром гепатозе. Мышам линии BALB/c интрагастрально был введен 50% раствор CCl4 в оливковом масле (4,5 мл/кг). HGFR-связывающий домен InlB был клонирован из клинического штамма L. monocytogenes. Очищенный препарат белка, обозначенного InlB321/15, введен внутривенно на 4-й и 7-й день в дозе 1 мг/кг. Биохимические, морфологические и гистологические параметры печени изучены на 7, 11, 15, 18 и 21 дни. В качестве контроля использовали рекомбинатный HGF. По сравнению с контрольными животными, не получающими лечения, у животных, получавших Inl B321/15 и HGF, наблюдалось уменьшение массы печени и восстановление биохимических показателей, начиная с 7-х сут. Уровень аланинаминотрансферазы (ALT) у мышей, получивших препарат Inl B321/15, достиг нормы на 15-й день, в то время как у мышей, получавших препарат HGF - на 18-й. Гистологические данные находились в соответствии с морфологическими и биохимическими показателями. In vitro анализ эффекта InlB 321/15 на клетки HepG-2 и HUVEC показал, что InlB 321/15 в концентрации 7 мкМ стимулирует автофосфорилирование HGFR и активность нижележащих путей: в частности, наблюдалось фосфорилирование Erk1/2 киназы. Митогенная активность InlB 321/15 была показана на указанных клетках по увеличению митотического индекса (19,6 и 5,8, соответственно), что превышало показатели, полученные для HGF (13,6 и 3,6, соответственно). Обработка InlB 321/15 приводила к перестройкам цитоскелета и увеличению подвижности клеток. В целом, полученные результаты показывают, что бактериальный агонист HGFR, белок InlB 321/15, стимулирует регенерацию печени при остром гепатозе, воздействуя на сигнальные пути, контролируемые рецептором HGFR.