Razrabotka metoda kletochnoy immunoterapii tsitokin-indutsirovannymi kletkami killerami v onkologii

Abstract

Full Text

Цитокин-индуцированные клетки киллеры (CIK), полученные из лимфоцитов периферической крови онкологических больных при активации в присутствии цитокинов in vitro, обладают рядом модулирующих функций и участвуют в противоопухолевой защите. Целью работы явилась разработка метода клеточной иммунотерапии (КИТ) активированными лимфоцитами больных меланомой. Для получения CIK выделенные МНК культивировали на протяжении 10-14 дней в среде Х-vivo 20, содержащей рекомбинантный альбумин человека с добавлением 250 МЕ/мл IL-2 и 50 нг/мл IL-15. Субпопуляционный состав лимфоцитов до и после активации оценивали на проточном цитофлуориметре FACScan. Оценку кинетики роста, пролиферативную и цитотоксическую активность культивируемых клеток оценивали с помощью сканирующей системы микроскопирования IncuСyteZoom (EssenBioScience, CI+ІА). Иммунотерапию (ИТ) CIK-клетками проводили 28 больным диссеминированной меланомой от 26 до 82 лет II-III стадии заболевания после химиолучевой терапии. Клеточный продукт и CIK в количестве 30-100 млн вводили внутрикожно 1-2 раза в неделю на протяжении 1-3 мес. Оценка результатов лечения проводилась в соответствии с критериями irRC (Immunerelated Response Criteria). Культура CIK характеризуется присутствием 70-80% эффекторных клеток (CTL, NK, NKT) и повышенной пролиферативной и цитотоксической активностью, отличается высоким уровнем экспрессии активирующих рецепторов CD38, CD25, CD69, NKG2D и HLA-DR. Ни у одного пациента не было замечено ухудшения самочувствия, нежелательных явлений и побочных реакций (лихорадки, изъязвлений в месте инъекции, аллергических реакций, желудочно-кишечных расстройств, тошноты, рвоты). Отмечено снижение побочных эффектов химиотерапии (ХТ) и уменьшение миелотоксического действия ХТ препаратов, что выражалось в отсутствии лейкопении и лимфопении у большинства больных (83,4%), которым проводили КИТ как сопроводительную. Через 17 мес. от начала наблюдения живы 24 (85,7%) человека, частичный ответ с уменьшением размеров метастатических образований - у 3 (10,7%) человек, стабилизация процесса - у 20 (71,4%) больных. Полученные результаты превосходят имеющиеся литературные данные зарубежных исследователей по эффективности КИТ активированными лимфоцитами [ParkhurtM.R. et al. 2011; SakamotoN. et al. 2015; KnorrD. et al. 2014]. Медиана времени от начала КИТ до прогрессирования - 6 мес.. По данным литературы показатель выживаемости для больных меланомой после различных режимов ХТ не превышает 5-11 мес., а при использовании ИТ цитокинами составляет 8,2±3 мес. Время наблюдения за больными после комплексного лечения с момента начала КИТ - более 12 мес., что в два раза превышает данные литературы. КИТ CIK является безопасным методом лечения, позволяет увеличить продолжительность безрецидивного периода, уменьшить количество побочных эффектов ХТ и улучшить результаты комплексного лечения больных меланомой.