Regeneratsiya pul'py zuba pri transplantatsii tkaneinzhenernykh konstruktsiy na osnove autologichnykh kletok iz pul'py zubov

Abstract

Full Text

ВВЕДЕНИЕ. Восстановление жизнеспособной ткани пульпы зуба при нарушении целостности пульпарной камеры в отсутствие воспалительных процессов является важной клинической задачей, позволяющей сохранить зуб. ЦЕЛЬЮ настоящей работы является изучение регенерации тканей пульпы при трансплантации аутологичных мезенхимальных стволовых клеток (МСК) пульпы коренных зубов в составе фибринового сгустка в пульпарную камеру после пульпоэктомии у миниатюрных свиней. Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 64 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. Культуры МСК получали из зубов миниатюрных свиней. Зубы обрабатывали хлоргексидином, извлекали пульпу и дезагрегировали ткани путем инкубации в растворе коллагеназы I типа (2 мг/мл). Клеточную культуру инкубировали в ростовой среде: ДМЕМ, 10% ЭТС, 100 мг/л амикацина при стандартных культуральных условиях. Затем клеточную суспензию суспензировали в обогащенной тромбоцитами плазме крови с последующей полимеризацией в присутствии тромбина и хлористого кальция. Трансплантат помещали на дно пульпарной камеры в область частично резецированной пульпы премоляров и моляров миниатюрных свиней. Животных выводили из эксперимента на 14, 30 и 60 сут. Зубной ряд удаляли путем остеотомии альвеолярного гребня, после чего ленточной пилой индивидуализировали образцы зубов вместе с окружающей костной тканью. Зубы фиксировали и заливали в полиэтилметакрилат, производили из них шлифы толщиной 35-50 мкм, которые окрашивали толуидиновым синим и кислым фуксином. РЕЗУЛЬТАТЫ. Через 14 сут. после трансплантации тканеинженерной конструкции в пульпарной камере выявляется трансплантат, имеющий характерную базофильную клеточную структуру. Устья каналов корней со стороны пульпарной камеры по внутренней поверхности содержат участки с ячеистой структурой, часто богатой сосудами и высокой плотностью клеток, напоминающей грануляционную ткань. К 60-м суткам между сосудами выявляется рыхлый волокнистый матрикс, заполняющий до 2/3 объема. В области дна и боковых стенок пульпарной камеры заметны отложения дентина, а под трансплантатом выявляются дентиновые мостики, признаки образования которых наблюдались уже на 30 сут. Коронка зуба сохраняет целостность своей структуры на протяжении всех сроков наблюдения. В контрольной группе (без трансплантации тканеинженерной конструкции) пульпарная камера содержит обрывки волокнистых структур без клеточных элементов. Коронка зуба к 60 сут. наблюдения имеет трещины и сколы. Корни зуба и шейка зуба с очаговыми признаками остеокластической резорбции, чаще в области межкорневой щели. Таким образом на модели частичной резекции пульпы премоляров и моляров у минитюрных свиней показано, что трансплантация аутологичных мультипотентных стромальных клеток пульпы зуба в сочетании с аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмой приводит к восстановлению пульпы зуба, репаративному дентино-генезу с образование дентиновых мостиков к 30 сут. наблюдения.