OTsENKA TsITOTOKSIChNOSTI I TsITOSOVMESTIMOSTI VYSOKOOChIShchENNOGO KOLLAGENOVOGO GIDROGELYa S PERSPEKTIVOY EGO PRIMENENIYa V KAChESTVE OSNOVY DLYa KOSTNO-PLASTIChESKOGO MATERIALA

Abstract

Full Text

АКТУАЛЬНОСТЬ. Биосовместимые полимеры используются в качестве материалов для замещения костных дефектов и стимуляции репаративного неоостеогенеза. По сравнению с аналогами препараты нативного коллагена, полученные по технологии ООО фирмы «Имтек» (Москва) (экстракция в форме, раствора, очистка от белковых примесей, защита от химической модификации) демонстрируют полное отсутствие немедленных или отсроченных реакций отторжения при имплантации образцов в различные органы животных. Механические свойства плотных гидрогелей производства «Имтек», в том числе коллагеновых гелей, наполненных гидроксилапатитом, близки к свойствам используемых в стоматологической практике коммерческих костно-пластических материалов. Перспективность применения таких препаратов в сочетании с приемами клеточной инженерии дает основу создания новых подходов при выполнении костно-пластических операций. ЦЕЛЬ. Оценить цитотоксичность и цитосовместимость препарата Колладентс (Имтек, Москва) в отношении мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) различного происхождения. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. Гидрогель на основе коллагена Колладентс был помещён в питательную среду DMEM (ПанЭко, Россия) на 3 сут. в соотношении 1:1. Полученный экстракт питательной среды ежедневно добавляли к культурам ММСК, выделенных из жировой ткани и пульпы молочных зубов (SHED-клеток) трёх различных доноров. Через 1, 4, 7 сут. выполняли МТТ-тест по общепринятой методике. В качестве контроля использовали водные экстракты из материалов «Индост-Гель», «Индост (гранулы)» (Полистом, Россия) и «Bio-Oss» (Geistlich, Швейцария), «Биопласт» (ВладМива, Россия) и чистую питательную среду. Для определения клеточной адгезии клетки сажали на поверхность материалов и окрашивали витальным красителем PKH-26. Далее на 1, 7 и 14 сут. получали изображения клеток на поверхности материала с помощью флуоресцентной микроскопии. РЕЗУЛЬТАТЫ. Водные экстракты исследуемых материалов не оказывали статистически значимого Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине 57 цитотоксического воздействия на культуры ММСК, выделенные из жировой ткани. Однако для культур SHED-клеток на 1-е и 3-е сут. эксперимента было показано цитотоксическое воздействие материалов «Индост (гранулы)» и «Bio-Oss», к 4-м и 7-м сут. эксперимента слабое (не ниже 80% относительной выживаемости клеток). На всех сроках наблюдения исследуемый материал «Колладентс» и «Индост-Гель» не показывали статистически значимого цитотоксического воздействия на относительную выживаемость клеток. Все исследуемые материалы способствовали клеточной адгезии.