Kletochnye plasty iz mezenkhimnykh stromal'nykh kletok vyzyvayut zazhivlenie glubokogo defekta myagkikh tkaney u krysy

Abstract

Full Text

ВВЕДЕНИЕ. Лечение ран и восстановление объемных дефектов тканей - серьезная медицинская задача, для решения которой современные методы часто оказываются недостаточно эффективными, что приводит к инвалидизации пациентов. Мезенхимные стромальные клетки (МСК) в настоящее время активно применяются для восстановления поврежденных тканей благодаря их репаративному потенциалу и простоте получения. Тканеинженерные технологии, такие как создание клеточных пластов (КП), могут иметь существенные преимущества для заживления ран вследствие более высокой жизнеспособности клеток, наличия в их составе нативных белков матрикса и активных факторов роста. ЦЕЛЬ. Сравнить эффективность заживления глубоких ран у крысы под влиянием МСК жировой ткани, трансплантированных в виде суспензии и в составе КП. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. МСК были выделены из подкожной жировой клетчатки самцов крыс Wistar. У наркотизированных животных иссекали кожнофасциальный лоскут, подкожный жир и создавали дефект трапециевидных мышц спины. С целью предотвращения естественной раневой контракции края раны фиксировали к внутреннему краю латексного кольца. Трансплантацию МСК осуществляли путем микроинъекций в дно раны (1,5 млн клеток в 1 мл фосфатно-солевого буфера, 5 микроинъекций по 200 мкл), либо путем аппликации КП после его открепления с культурального пластика (площадь лунки 9 см2, количество клеток в начальный момент сборки - 450 тыс., культивирование в течение 7 сут.). В группе отрицательного контроля животные не получали специфического лечения. Заживление ран оценивали по скорости закрытия раневого дефекта, динамики изменения площадей грануляционной ткани и зоны фиброза при гистологических Гены & Клетки Том XII, № 3, 2017 28 материалы III национального конгресса по регенеративной медицине исследованиях, а также по плотности сосудов на срезах биоптатов со дна раны. РЕЗУЛЬТАТЫ. Полученные КП представляли собой многослойную конструкцию толщиной до 30 мкм, имели в своем составе коллаген I типа, ламинин, фибронектин. Трансплантация МСК значительно ускорила заживление ран по сравнению с контролем, причем использование КП показало большую эффективность по сравнению с использованием МСК в суспензии. Закрытие дефекта в группе КП наблюдалось к 28-му дню после операции, в группе применения суспензии клеток - к 35-му дню и в группе контроля - после 49-го дня проведения эксперимента. Морфометрический анализ гистологических образцов показал более ранние сроки образования и созревания грануляционной ткани, активный ангиогенез и быстрый переход к формированию коллагеновых депозитов и фиброзированию после трансплантации МСК. ВЫВОДЫ. В модели глубокой шинированной раны мягких тканей крысы доставка КП из МСК продемонстрировала высокую эффективность в восстановлении тканей по сравнению с отрицательным контролем и применением клеток в суспензии, выражающуюся в сокращении сроков созревании грануляционной ткани, отложения коллагена и закрытия раневого дефекта. Полученные результаты позволяют рассматривать этот подход как перспективный метод заживления ран.