Vliyanie modifitsirovannogo rostovymi faktorami biodegradiruemogo matriksa na proliferatsiyu kletok IN VITRO i stimulyatsiyu angiogeneza IN VIVO

全文:

Обеспечение физиологически релевантного клеточного микроокружения является в настоящее время серьезной проблемой при создании каркасов и тканеинженерных конструкций на основе биосовме-стимых и биодеградируемых полимерных материалов. Функционализация материалов биологически активными соединениями применяется как один из способов индукции формирования кровеносных сосудов в зоне имплантации. В качестве таких соединений в основном применяются белковые ростовые факторы, но также могут быть использованы и терапевтические нуклеиновые кислоты. ЦЕЛЬ. Изучить влияние модифицированных ростовыми факторами и нуклеиновыми кислотами био-деградируемых матриксов на пролиферацию клеток in vitro и стимуляцию ангиогенеза in vivo. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. С целью ангиогенной функционализации выполнялась модификация волокнистых матриксов из поликапролактона (ПКЛ), с использованием зелёного флуоресцентного белка (GFP), эпидермального фактора роста (EGF) и препарата «Неоваскулген» (плазмида pCMV-VEGF165). Растворы белков и биологически активных соединений в фосфатном буфере вводили в состав прядильных растворов на основе хлороформа, содержащих 1% плюроника F-127. Оценивали способность способа модификации к включению биологически активных соединений в состав матрицы на примере GFP с использованием конфокальной флуоресцентной микроскопии. Изучали влияние инкорпорированного EGF в составе матрикса на пролиферацию in vitro линии MCF7 путем биосенсорного анализа клеточного индекса в режиме реального времени на клеточном анализаторе iCelligence (ACEA, США). Влияние функ-ционализации биодеградируемого матрикса препаратом «Неоваскулген» на ангиогенез in vivo изучали путем его подкожной имплантации 24 крысам линии Вистар в область спины на сроки 16 и 33 сут. РЕЗУЛЬТАТЫ. Флуоресцентная конфокальная микроскопия показала возможность включения GFP в волокна из ПКЛ. Модифицированные EGF матриксы стимулировали пролиферацию культур эпителиальных клеток in vitro: средний клеточный индекс составил 465% против 160% в контроле. В исследовании in vivo матрикса, модифицированного препаратом «Неоваскулген», на 33 сут. отмечено увеличение плотности сосудов в зоне импланта в среднем на 41% по сравнению с контролем. Волокнистый матрикс из ПКЛ обладал низкой цитотоксичностью. Время полной биодеградации волокнистого матрикса из ПКЛ in vivo составило не более 60 сут. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Биологический эффект in vivo свидетельствует о возможности ангиогенной функционализации биосовместимых матриксов при их модификации нуклеиновокислотными молекулами.

作者简介

A. Lyundup

T. Tenchurin

A. Shepelev

I. Klabukov

Email: ilya.klabukov@gmail.com

D. Mudryak

A. Titov

M. Balyasin

Yu. Lyashenko

S. Chvalun

T. Dyuzheva

参考

补充文件