Obtaining and characteristics of the cryobank of subcultures of primary cells of a goatling's testicular tissue

Resumo

Texto integral

Первичные культуры клеток являются наиболее востребованной лабораторной моделью для выделения полевых изолятов вирусов. Основные проблемы использования этих клеточных систем связаны с необходимостью получения исходной ткани с высоким содержанием клеток-мишеней и возможностью эндогенной вирусной контаминации. Для некоторых возбудителей особо опасных вирусных инфекций крупного и мелкого рогатого скота установлен высокий уровень пермиссивности первичных культур клеток тестикул козленка, изготовление которых не связано с убоем животных доноров ткани, однако ограничения накладывает сезонность (весенний период) получения ткани, т. к. показано, что для сохранения чувствительности к вирусам культур необходимо использовать тестикулярную ткань от доноров не старше 1,5 месяцев. В ряде работ показано, что на ранних пассажах субкультуры первичных клеток частично сохраняют клеточные характеристики исходной ткани и могут быть использованы для выделения полевых вирусов. Целью исследований явилось получение и оценка биологических свойств субкультур клеток тестикул козленка (ТК). Стандартной трипсинизацией тестикулярной ткани 1 ,2-месячного козленка зааненской породы получена первичная культура клеток ТК. Конфлюэнтный монослой культуры был представлен клетками преимущественно фибробластоподобного типа, которые формировали направленные клеточные «потоки» с островками эпители-оподобных клеток. Последовательными пересевами в среде Игла-МЕМ с 10% фетальной сыворотки КРС получены субкультуры, которые на уровне 3, 5, 7 пассажей криоконсервированы в жидкий азот.