CULTIVATION OF THREE-DIMENSIONAL CELL LIVER MODELS
- Авторлар: Nurieva C.K1, Naumenko E.A1, Rozhina E.V1, Zakirova E.Y.1, Akhatova F.S1, Guryanov I.D1, Fakhrullin R.F1
-
Мекемелер:
- Kazan Federal University
- Шығарылым: Том 15, № 3S (2020)
- Беттер: 22-23
- Бөлім: Articles
- ##submission.dateSubmitted##: 16.01.2023
- ##submission.datePublished##: 15.12.2020
- URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/122539
- DOI: https://doi.org/10.23868/gc122539
- ID: 122539
Дәйексөз келтіру
Толық мәтін
Аннотация
Толық мәтін
Последние достижения в области трехмерной технологии культивирования клеток включают использование плюрипотентных стволовых клеток и взрослых стволовых клеток, которые культивируются in vitro для формирования самоорганизующихся систем. Органоиды - это самоорганизующиеся многоклеточные структуры, которые повторяют структуру, функции органов и могут использоваться для моделирования развития, поддержания и восстановления органов ex vivo. Модельные органоиды могут быть получены из дифференцированных клеток, которые обладают необходимыми функциональными свойствами. Нами были получены клеточные сфероиды из двух типов клеток: HepG2 (гепатома человека) и HUVEC (эндотелиальные клетки пупочной вены) в качестве модели печёночного органоида. Выявлено, что клетки гепатомы формировали плотный органоид, тогда как клетки эндотелия распределялись в его толще, имитируя кровеносные сосуды. Также были сформированы сфероиды из первичных гепатоцитов крысы. Оценка физиологического состояния клеток в их составе выявила наличие гипоксийного ядра, характерного для трёхмерных клеточных структур. В целом, получение физиологически полноценных сфероидов из первичных клеток печени, не способных к длительному культивированию в культуре, является важным для дальнейшего использования 3D культур в создании моделей патологических изменений печёночной ткани. На следующем этапе нами были выделены клетки печеночного протока (по протоколу компании STEMCELL Technologies), среди которых предположительно имеются стволовые клетки печени, в частности, перисинусоидальные клетки. Клеточные суспензии заключали в купол из белкового матрикса Matrigel, который создаёт необходимые физико-химические условия для формирования гепатоцеллюлярных органоидов. Полученные клеточные структуры были проанализированы с привлечением методов иммунофлуо-ресцентного окрашивания с последующей микроскопией. Выявлено, что часть клеток, формирующих полученные органоиды, позитивно окрашивались на десмин, что является одним из маркеров перисинусоидальных клеток. Далее мы планируем проведение дифференцировки клеток в составе органоидов для получения зрелых форм и моделирования начальных стадий фиброза.Авторлар туралы
C. Nurieva
Kazan Federal University
Email: chulpan.nurieva.97@gmail.com
Kazan, Russia
E. Naumenko
Kazan Federal UniversityKazan, Russia
E. Rozhina
Kazan Federal UniversityKazan, Russia
E. Zakirova
Kazan Federal UniversityKazan, Russia
F. Akhatova
Kazan Federal UniversityKazan, Russia
I. Guryanov
Kazan Federal UniversityKazan, Russia
R. Fakhrullin
Kazan Federal UniversityKazan, Russia
Әдебиет тізімі
Қосымша файлдар
![](/img/style/loading.gif)