Structural dynamics of adhesive bone marrow cells in cultivation: first passage (part 2)



Дәйексөз келтіру

Толық мәтін

Ашық рұқсат Ашық рұқсат
Рұқсат жабық Рұқсат берілді
Рұқсат жабық Рұқсат ақылы немесе тек жазылушылар үшін

Аннотация

Исследована морфология и структурная динамика адгезивных клеток костного мозга человека после первого рассева первичной культуры (культивированных в виде ад-гезированного монослоя на плотном субстрате стеклянного или пластикового дна культурального флакона). Выявлены визуализируемые структурные изменения, которые приобретают клетки в искусственных условиях in vitro, прослежена их динамика при переходе от первичной культуры к клеточной линии. Охарактеризованы адгезивные клетки на разных этапах культивирования: 1) во взвеси перед рассевом, после их открепления от подложки и округления; 2) при прикреплении к дну флакона и распластывании; 3) при образовании монослоя. Наиболее выраженными структурными изменениями являются выпячивания или складчатость клеточной мембраны, образующиеся у культивируемых клеток после открепления от дна культуральных флаконов и помещения в питательную среду во взвешенном состоянии. Наблюдалось значительное обводнение клеточного матрикса. В больших выпячиваниях мембраны клеточный матрикс отсутствовал. Динамика структурных изменений культивируемых клеток оценивалась методом светооптической микроскопии с помощью дифференциального интерференционного контраста по Номарскому и документировалась автоматической цифровой цейтра-ферной съемкой в условиях культурального инкубатора, интегрированного с инвертированным микроскопом. Для визуализации клеточных структур вне пределов разрешающей способности светового микроскопа использовалась трансмиссионная электронная микроскопия. Выявленное многообразие структурных форм адгезивных клеток на дне культурального флакона может быть связано с присутствием в составе костного мозга разных соединительнотканных дифферонов.

Толық мәтін

Рұқсат жабық

Авторлар туралы

N. Omelianenko

N.N. Priorov Central Research Institute of Traumatology and Orthopedics, Moscow, Russia

V. Ilyina

N.N. Priorov Central Research Institute of Traumatology and Orthopedics, Moscow, Russia

A. Kovalev

N.N. Priorov Central Research Institute of Traumatology and Orthopedics, Moscow, Russia

S. Rodionov

N.N. Priorov Central Research Institute of Traumatology and Orthopedics, Moscow, Russia

Әдебиет тізімі

  1. Caplan A.I. Mesenchymal stem cells. J. Orthop. Res. 1991; 9(5): 641-50.
  2. Colter D.C., Sekiya I., Prockop D.J. Identification of a subpopulation of rapidly self-renewing and multipotential adult stem cells in colonies of human marrow stromal cells. PNAS USA 2001; 98: 7841-5.
  3. Smith J.R., Pochampally R., Perry A. et al. Isolation of a highly clonogenic and multipotential subfraction of adult stem cells from bone marrow stroma. Stem Cells 2004; 22: 823-31.
  4. Sekiya I., Larson B.L., Smith J.R. et al. Expansion of human adult stem cells from bone marrow stroma: conditions that maximize the yields of early progenitors and evaluate their quality. Stem Cells 2002; 20: 530-41.
  5. Lee R.H., Hsu S.C., Munoz J. et al. A subset of human rapidly self-renewing marrow stromal cells preferentially engraft in mice. Blood 2006; 107(5): 2153-61.
  6. Омельяненко Н.П., Ильина В.К., Ковалев А.В. и др. Структурная динамика адгезивных клеток костного мозга при культивировании: первичный пассаж (часть 1). Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2012; VII (4): 28-37.
  7. Глебов Р. Н. Эндоцитоз и экзоцитоз. В: Биохимия мембран: Учеб. пособие для биолог. и мед. спец. Вузов. Болдырев А.А., редактор. Москва: Высшая школа; 1987. С. 1-95.
  8. Фрешни Р. Я. Культура животных клеток: практическое руководство. Пер. 5-го англ. изд. Москва: БИНОМ, Лаборатория знаний; 2010.
  9. Lee R.H., Seo M.J., Pulin A.A. et al. The CD34-like protein PODXL and alpha 6-integrin (CD49f) identify early progenitor MSCs with increased clonogenicity and migration to infarcted heart in mice. Blood 2009; 113 (4): 816-26.
  10. Tondreau T., Lagneaux L., Dejeneffe M. et al. Isolation of BM mesenchymal stem cells by plastic adhesion or negative selection: phenotype, proliferation kinetics and differentiation potential. Cytotherapy 2004; 6(4): 372-9.
  11. Гололобов В.Г., Деев Р.В. Стволовые стромальные клетки и остеобластический клеточный дифферон. Морфология 2003; 1: 9-19.
  12. Суздальцева Ю.Г., Бурунова В.В., Вахрушев И.В. и др. Сравнение способности к дифференцировке мезенхимальных клеток человека, выделенных из разных источников, в ткани мезодермаль-ного происхождения. Клеточные технологии в биологии и медицине 2007; 1: 3-10.
  13. Muraglia A., Cancedda R., Quarto R. Clonal mesenchymal progenitors from human bone marrow differentiate in vitro according to a hierarchical model. J. Cell Sci. 2000; 113: 1161-8.
  14. Онищенко Н.А. Клеточные технологии и современная медицина. Патологическая физиология и экспериментальная терапия 2004; 4: 2-11.
  15. Bara J.J., Richards R.G., Alini M. et al. Concise review: bone marrow-derived mesenchymal stem cells change phenotype following in vitro culture: implications for basic research and the clinic. Stem Cells 2014; 32(7): 1713-23.
  16. Елисеев В.Г. Соединительная ткань. Гистофизиологические очерки. Москва: Государственное издательство медицинской литературы; 1961.
  17. Uchiyama Y. Apoptosis: The history and trends of its studies. Arch. Histol. Cytol. 1995; 58 (2): 127-37.
  18. Charras G.T. A short history of blebbing. J. Microsc. 2008; 231(3): 466-78.
  19. Pittenger M.F., Mosca J.D., Mcintosh K.R. Human mesenchymal stem cells: progenitor cells for cartilage, bone, fat and stroma. Curr. Top Microbiol. Immunol. 2000; 251: 3-11.
  20. Paluch E.K., Raz E. The role and regulation of blebs in cell migration. Curr. Opin. Cell Biol. 2013; 25 (5): 582-90.
  21. Tyson R.A., Zatulovskiy E., Kay R.R. et al. How blebs and pseudopods cooperate during chemotaxis. PNAS USA 2014; 111(32): 11703-8.
  22. Jones E., Schafer R. Biological differences between native and cultured mesenchymal stem cells: implications for therapies. Methods Mol. Biol. 2015; 1235: 105-20.

Қосымша файлдар

Қосымша файлдар
Әрекет
1. JATS XML
Жүктеу

© Eco-Vector, 2014


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: 

Осы сайт cookie-файлдарды пайдаланады

Біздің сайтты пайдалануды жалғастыра отырып, сіз сайттың дұрыс жұмыс істеуін қамтамасыз ететін cookie файлдарын өңдеуге келісім бересіз.< / br>< / br>cookie файлдары туралы< / a>