The investigation was aimed to establish conditions for isolation and culturing cells of cartilaginous tissue procured from different sources.
Methods of chondrocytes obtaining and cultureing were compared. The chondrocytes were procured from human fetal cartilaginous tissue and the spinal column of patients with idiopathic scoliosis, as well as intervertebral disks of a new-born dog backbone.
The investigations of obtaining and culturing of chondrocytes from different sources showed that using collagenase solutions during 12-16 h at 37°С with continuous interfusion allowed to receive cells suspension with more than 90% viability. The maximal amount of viable chondrocytes was derived while segregating cells using 0.15% collagenase. Нuman fetal cartilaginous tissue and that of dog intervertebral disks is being dissociated in collagenase for 5-8 h, tissue from the spinal column of patients with idiopathic scoliosis for 18-20 h.
While culturing human fetal chondrocytes had the best proliferating capability. The culture of chondrocytes from the spinal column of idiopathic scoliosis patients had low proliferation index and a short culturing time as compared with fetal culture.
Целью данного исследования явилась отработка условий получения и культивирования клеток хрящевых тканей, полученных из различных источников.
В работе проводили сравнение способов выделения и культивирования хондроцитов, полученных из хрящевой ткани фетусов человека и из позвоночника больных идиопатическим сколиозом, а также из хрящевой ткани межпозвонковых дисков новорожденной собаки. Исследования по подбору условий выделения и культивирования хондроцитов показали, что применение растворов коллагеназы в течение 12-16 часов при температуре 37°С и непрерывном перемешивании позволяет получить суспензию клеток с жизнеспособностью более 90%. Максимальное количество жизнеспособных хондроцитов наблюдали при выделении клеток с помощью 0,15% коллагеназы. Хрящевая фетальная ткань человека и межпозвонковых дисков собаки диссоциируется в коллагеназе 5-8 часов, ткань позвоночника больных идиопатическим сколиозом 18-20 часов. При культивировании наилучшей пролиферативной способностью обладали хондроциты фетуса человека. Культура хондроцитов, полученных из позвоночника больных идиопатическим сколиозом, обладала низким показателем индекса пролиферации и коротким сроком культивирования по сравнению с фетальной культурой.