Genes & CellsGenes & CellsГены и КлеткиGenes and Cells2313-18292500-2562Human Stem Cells Institute12199510.23868/202012012ArticlesСтатьиResearch ArticleGenetic diagnostics and treatment of young adult acute myelomonoblastic leukemia patient using double haploidentic bone marrow transplantationОпыт генодиагностики и лечения острого миеломонобластного лейкоза у больной молодого возраста с применением двойной гаплоидентичной трансплантации костного мозгаVinogradovA. VВиноградовА. Вa.vinogradov@egov66.ruIzotovD. VИзотовД. ВRezaykinA. VРезайкинА. ВAnisimovaI. VАнисимоваИ. ВKonstantinovaT. SКонстантиноваТ. СKudryashovaA. VКудряшоваА. ВSazonovS. VСазоновС. ВSergeevA. GСергеевА. ГUral State Medical UniversityУральский государственный медицинский университетSverdlovsk Regional Clinical Hospital N 1Свердловская областная клиническая больница № 1Institute of Medical Cell TechnologiesИнститут медицинских клеточных технологий10122020154VOL 15, NO4 (2020)ТОМ 15, №4 (2020)707416012023Copyright ©; 2020, Eco-VectorCopyright ©; 2020, Эко-Вектор2020Eco-VectorЭко-Векторhttps://genescells.ru/2313-1829/article/view/121995

Treatment ofprognostically unfavorable forms ofacute leukemia isaserious problem ofhematology, since their frequency inthe group ofadult patients reaches 60%, and inelderly patients- 80-90%.Aim: toanalyze the case ofdiagnostics and treatment ofacute myelomonoblastic leukemia with anunfavorable genetic prognosis inayoung adult female using double haploidentical bone marrow transplantation.Samples ofbone marrow and peripheral blood ofpatient K., 35years old, who recived program chemotherapy and double haploidentical bone marrow transplantation inthe Sverdlovsk Regional Hematological Centre were examined.Atthe onset ofdisease was noted hyperleukocytosis, blastaemia and infiltration ofleukemic cells inthe bone marrow. Cytochemical reactions tolipids were positive in7,0% ofblasts, small-granular and large-granular glycogen was detected in24,0% ofblast cells, and diffuse- in22,0%. Immunophenotypically, 28,0% ofblast cells were characterized byexpression ofHLA-DR, CD13, CD33, CD34, CD38, CD117, MPO-cyt, 13,0%- CD33, CD11cyt, CD64, CD14. The cytogenetic study determined the karyotype 48, XX, +4, +21[2]/ 47, XX, +4[3]/ 46, XX[2]. Non-synonymous transversions с. 2447A>Тinс-KIT gene, с.215С>GinТР53, and transition с. 2644С>ТinDNMT3A were detected using direct sequencing method. Despite the detection ofoncogenic mutations, the tumor was chemosensitive topolychemotherapy (including anthracyclines with cytarabine). However, given the unfavorable genetic prognosis, itwas decided toperform abone marrow transplantation. Due tothe lack ofanHLA-matched unrelated donor, the first haploidentical transplantation was performed from the patient'seldest daughter. At+51day, transfusion ofdonor white blood cells with correction ofthe immunosuppression scheme was performed tocorrect persistent pancytopenia. At+ 71day after the first transplantation, taking into account the remaining pancytopenia, asecond haploidentic transplantation from the patient'syounger daughter was performed. The total duration ofhematological remission was 48months, including 36months after the second haploidentical bone marrow transplantation.

Лечение прогностически неблагоприятных форм острых лейкозов является серьезной проблемой гематологии, так как их частота в группе взрослых пациентов достигает 60%, а у больных пожилого и старческого возраста - 80-90%. Цель исследования - проанализировать случай диагностики и лечения острого миеломонобластного лейкоза с неблагоприятным генетическим прогнозом у больной молодого возраста с применением двойной гаплоидентичной трансплантации костного мозга. Исследовали пробы костного мозга и периферической крови больной К., 35 лет, получавшей программное химиотерапевтическое лечение, а впоследствии - двойную гаплоидентичную трансплантацию костного мозга в Свердловском областном онкогематологическом центре. В дебюте заболевания были отмечены гиперлейкоцитоз, бластемия и лейкемическая инфильтрация костного мозга. Цитохимические реакции на липиды были положительны в 7,0% бластов, мелкогранулярный и крупногранулярный гликоген был определен в 24,0% бластных клеток, диффузный - в 22,0%. Был охарактеризован иммунофенотип бластных клеток: 28,0% из них экспрессировали HLA-DR, CD13, CD33, CD34, CD38, CD117, MPO-cyt, 13,0% - CD33, CD11cyt, CD64, CD14. При цитогенетическом исследовании был определен анеуплоидный кариотип: 48, XX, +4, +21 [2]/47, ХХ, +4 [3]/46, ХХ [2]. Методом прямого секвенирования были выявлены несинонимичные трансверсии с. 2447 А>Т в гене с-KIT и с.215 C>G в гене ТР53, а также транзиция с. 2644 С>Т в гене DNMT3A. Несмотря на выявление онкогенных мутаций, опухоль была химио-чувствительна к программной полихимиотерапии антрациклинами в сочетании с цитарабином. Однако, учитывая неблагоприятный генетический прогноз, было решено выполнить пациентке трансплантацию костного мозга. Из-за отсутствия HLA-совместимого неродственного донора, первая гаплоидентичная трансплантация была проведена от старшей дочери пациентки. На +51 сут. для коррекции персистирующей панцитопении была осуществлена трансфузия донорских лейкоцитов с коррекцией схемы иммуносупрессии. На +71 сут. от первой трансплантации, учитывая сохраняющуюся панцитопению, была выполнена вторая гаплоидентичная трансплантация от младшей дочери пациентки. Общая продолжительность клинико-гематологической ремиссии составила 48 мес., в т. ч. после второй гаплоидентичной трансплантации костного мозга - 36 мес.

acute myeloid leukemiadouble haploidentic bone marrow transplantationDNMT3A genec-KIT geneunfavorable genetic prognosisyoung adultострый миеломонобластный лейкоздвойная гаплоидентичная трансплантация костного мозгаген DNMT3Aген c-KITнеблагоприятный генетический прогнозмолодой возрастBullinger L., Dohner K., Dohner H. Genomics of Acute Myeloid Leukemia Diagnosis and Pathways. J. Clin. Oncol. 2017; 35(9): 934-46.Виноградов А.В., Резайкин А.В., Сергеев А.Г. Детекция мутаций генов FLT3, KIT, NRAS, TP53 и WT1 при острых миелоидных лейкозах с аберрантными кариотипами. Вестник Уральской медицинской академической науки 2015; 1: 77-84.Гиндина Т.Л., Мамаев Н.Н., Николаева Е.С. и др. Исход алло-генной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток при острых миелоидных лейкозах с гипердиплоидным кариотипом. Клиническая онкогематология 2016; 9(4): 383-90.Савченко В.Г., Паровичникова Е.Н., Афанасьев Б.В. и др. Национальные клинические рекомендации по диагностике и лечению острых миелоидных лейкозов взрослых. Гематология и трансфузиология 2014; 59(S.2): 2-29.Arber D.A., Orazi A., Hasserjian R. et al. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood 2016; 127: 2391-405.Виноградов А.В., Резайкин А.В., Сазонов С.В. и др. Молекулярно-генетический анализ мутаций в генах ASXL1, FLT3, KIT, NPM1, NRAS, TP53 и WT1 у больных острыми миелоидными лейкозами зрелого возраста. Медицинский вестник Северного Кавказа 2020: 15(1): 32-6.Виноградов А.В., Резайкин А.В., Салахов Д.Р. и др. Сравнительный анализ результатов типирования молекулярных повреждений гена NPM1 при острых миелоидных лейкозах с использованием прямого автоматического секвенирования и иммуногистохимического метода. Вестник Уральской медицинской академической науки 2013; 4: 124-7.Виноградов А.В., Резайкин А.В., Сергеев А.Г. Детекция точечных мутаций в гене DNMT3A при острых миелоидных лейкозах методом прямого автоматического секвенирования. Бюллетень сибирской медицины 2015; 14(1): 18-23.Zhang Z.M., Lu R., Wang P. et al. Structural basis for DNMT3A-mediated de novo DNA methylation. Nature 2018; 554(7692): 387-91.Mol C.D., Lim K.B., Sridhar V. et al. Structure of a c-Kit Product Complex Reveals the Basis for Kinase Transactivation. J. Biol. Chem. 2003; 278(34): 31461-4.Loghavi S., Zuo Z., Ravandi F. et al. Clinical features of de novo acute myeloid leukemia with concurrent DNMT3A, FLT3 and NPM1 mutations. J. Hematol. Oncol. 2014; 7: 74.Guo X., Wang L., Li J. et al. Structural insight into autoinhibition and histone H3-induced activation of DNMT3A. Nature 2015; 517(7536): 640-4.Laine E., de Beauchene I.C., Perahia D. et al. Mutation D816V Alters the Internal Structure and Dynamics of c-KIT Receptor Cytoplasmic Region: Implications for Dimerization and Activation Mechanisms. PLoS Comput. Biol. 2011; 7(6): e1002068.Raghav P.K., Singh A.K., Gangenahalli G. A Change in Structural Integrity of c-Kit Mutant D816V Causes Constitutive Signaling. Mutat. Res. 2018; 808: 28-38.Виноградов А.В., Резайкин А.В., Сазонов С.В. и др. Мутационный профиль острых миелоидных лейкозов у больных пожилого и старческого возрастов. Гены и клетки 2019; 14(4): 19-24.de Beauchene I.C., Tchertanov L. How Missense Mutations in Receptors Tyrosine Kinases impact Constitutive Activity and alternate Drug Sensitivity: Insights from Molecular Dynamics Simulations. Receptors & Clinical Investigation 2016; 3: e1372.Ardestani M.T., Kazemi A., Chahardouli B. FLT3-ITD Compared with DNMT3A R882 Mutation Is a More Powerful Independent Inferior Prognostic Factor in Adult Acute Myeloid Leukemia Patients After Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation: A Retrospective Cohort Study. Turk. J. Haematol. 2018; 35(3): 158-67.