Genes & CellsGenes & CellsГены и КлеткиGenes and Cells2313-18292500-2562Human Stem Cells Institute12165610.23868/gc121656ArticlesСтатьиPersonalized cell therapy in ophthalmology. I. Method for obtaining and phenotype of autologous productПерсонализированная клеточная терапияв офтальмологии.I. Метод получения и цитофенотип аутогенногоклеточного продуктаAvetisovS EАветисовС Э

State Research Institute of Eye Diseases RAMS

Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН

SubbotA MСубботА М

The Russian State Medical University

Российский государственный медицинский университет им. Н.И. Пирогова

AntochinA IАнтохинА И

The Russian State Medical University

Российский государственный медицинский университет им. Н.И. Пирогова

KasparovaE AКаcпароваЕ А

State Research Institute of Eye Diseases RAMS

Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН

KasparovA AКаспаровА А

State Research Institute of Eye Diseases RAMS

Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН

PavliukA SПавлюкА С

The Russian State Medical University

Российский государственный медицинский университет им. Н.И. Пирогова

State Research Institute of Eye Diseases RAMSНаучно-исследовательский институт глазных болезней РАМНThe Russian State Medical UniversityРоссийский государственный медицинский университет им. Н.И. Пирогова1506201162NO2 (2011)№2 (2011)384211012023Copyright ©; 2011, Eco-VectorCopyright ©; 2011, Эко-Вектор2011Eco-VectorЭко-Векторhttps://genescells.ru/2313-1829/article/view/121656

The method for obtaining activated in vitro by poly A:U autologous leucocytes from peripheral blood for corneal diseases treatment is developed. Method allows us to obtain a product with sufficient content of viable nucleated cells (up to 3106 cell/ml). Cellular composition of the product was determined. Mononuclear fraction decreased in 1,3 times and granulocyte portion is increased. Phenotype of lymphocytes in the cell product is the same as in peripheral blood, with selective loss of B-lymphocytes. The presence of CD14+/34low cells, which are considered to be progenitors, is defined in the product. Using of cell product, obtained by designed technique, may be promising in clinic, because of it minimal traumatism for the patient and simplicity.

Разработан метод получения аутогенных лейкоци- тов из периферической крови с активацией их in vitro полиадениловой-полиурациловой кислотой (полиА:У) для лечения заболеваний роговицы. Метод позволяет получить продукт с достаточным для проведения персонализированной клеточной терапии (ПКТ) содержанием жизнеспособных ядросодержащих клеток (до 3106 клеток/мл) в процес- сированной аутологичной сыворотке (ПАС). Исследован клеточный состав полученного продукта - содержание мононуклеарной фракции снижено в 1,3 раза, увеличена доля гранулоцитов. Содержание субпопуляций лимфоцитов в клеточном продукте соответствует составу перифери- ческой крови за исключением В-лимфоцитов, количество которых снижено в 5 раз. В составе продукта идентифи- цированы клетки с фенотипом CD14/CD34low, считающиеся способными к мультилинейной дифференцировке. При- менение клеточного продукта, полученного по разработан- ной методике, может быть перспективным в клинике, так как метод отличается минимальной травматичностью для пациента и простотой исполнения.

Patel S.A., King C.C., Lim P.K. et al. Personalizing stem cell research and therapy: the arduous road ahead or missed opportunity? Curr. Pharmacog. Person Med. 2010; 8(1): 25-36.Romagnani P., Lasagni L., Romagnani S. Peripheral blood as a source of stem cells for regenerative medicine. Expert. Opin. Biol. Ther. 2006; 6(3): 193-202.Seta N., Kuwana M. Human circulating monocytes as multipotential progenitors. Keio. J. Med. 2007; 56(2): 41-7.Romagnani P., Annunziato F., Liotta F. et al. CD14+CD34low cells with stem cell phenotypic and functional features are the major source of circulating endothelial progenitors. Circ. Res. 2005; 97(4): 314-22.Bader A., Macchiarini P. Moving towards in situ tracheal regeneration: the bionic tissue engineered transplantation approach. J. Cell. Mol. Med. 2010; 14(7): 1877-89.Parikh C.H., Edelhauser H.F. Ocular surgical pharmacology: corneal endothelial safety and toxicity. Curr. Opin. Ophthalmol. 2003; 14(4): 178-85.Alvarado J.A., Katz L.J., Trivedi S. et al. Monocyte modulation of aqueous outflow and recruitment to the trabecular meshwork following selective laser trabeculoplasty. Arch. Ophthalmol. 2010; 128(6): 731-7.Бурунова В.В. Проблемы стандартизации при получении клеточных культур мезенхимального происхождения: эксперименталь-ный и теоретический анализ (диссертация). Москва; 2011.Sugiyama T., Hoshino K., Saito M. et al. Immunoadjuvant effects of polyadenylic:polyuridylic acids through TLR3 and TLR7. Int. Immunol. 2008; 20(1): 1-9.Суббот А.М., Каспарова Е.А., Каралкин П.А. и соавт. // Ство- ловые клетки и регенеративная медицина /под редакцией В.А. Тка- чука. М.: МАКС ПРЕСС, 2011.- С. 162-172.Ковальчук Л.В., Павлюк А.С., Синюхин В.Н. и др. Анализ фармакологических средств на модели апоптоза лимфоцитов чело- века in vitro в норме и при иммунопатологии Аллергология и имму- нология 2000; 1: 24-30.Kavai T., Akira S. TLR signaling. Cell Death Differ. 2006; 13(5): 816-25.Boyum A. Separation of lymphocytes, lymphocyte subgroups and monocytes: a review. Lymphology 1977; 10(2): 71-6.Coulson A.S., Chalmers D.G. Separation of viable lymphocytes from human blood. Lancet 1964; 1: 468-9.Zhang Z., Schluesener H.J. Mammalian toll-like receptors: from endogenous ligands to tissue regeneration. Cell Mol. Life Sci. 2006; 63(24): 2901-7.Jaremko K.M., Chen-Roetling J., Chen L. et al. Accelerated hemolysis and neurotoxicity in neuron-glia-blood clot co-cultures. J. Neurochem. 2010; 114(4): 1063-73.