Казанский государственный медицинский университет, Казань
Казанский государственный медицинский университет, Казань
Казанский государственный медицинский университет, Казань
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань
Казанский государственный медицинский университет, Казань
Казанский государственный медицинский университет, Казань
Kazan State Medical University, Kazan
Kazan State Medical University, Kazan
Kazan State Medical University, Kazan
Kazan (Volga Region) Federal University, Kazan
Kazan State Medical University, Kazan
Kazan State Medical University, Kazan
Impairment of axon transport is widespread and early event in a number of neurodegenerative diseases. The goal of study is to investigate the mechanisms of retrograde axon transport impairment in mouse spinal motoneurons after application of -amyloid peptide (AP) (25-35) on the central stump of transected sciatic nerve. Retrograde fluorescent tracer Fluorogold (5%), AP (25-35) (10-6 М), or mix was applied to the proximal stump of the transected sciatic nerve of mouse under the general anesthesia. At 24 hours after surgery lumbar spinal cord was processed for morphometric and immunohistochemical analysis. The amount of Fluorogold-positive motoneurons at control was 1223,7162,7 (n = 7), whereas after application of AP(25-35) - 393,285,3 (n = 5, p < 0,01), which certifies pronounced inhibition of retrograde axonal transport. Staining with polyclonal antibodies against caspase-3 did not reveal motoneurons in apoptotic state. Staining with monoclonal antibodies against the AP (25-35) was negative both at operated and intact sides of spinal cord. Thus, revealed inhibitory action of AP (25-35) on the retrograde axon transport is not related to apoptotic death of neurons or accumulation of AP (25-35) inside the neuronal soma, but, evidently, is mediated by intraaxonal effects. Obtained data has great importance for understanding of mechanisms of Alzheimers disease pathogenesis.
Нарушение аксонного транспорта является широко распространенным явлением и ранним событием при многих нейродегенеративных заболеваниях. Целью данной работы стало изучение механизмов нарушения ретроградного аксонного транспорта в мотонейронах поясничного отдела спинного мозга мыши после аппликации -амилоидного пептида (АП) (25-35) на центральный отрезок перерезанного седалищного нерва. Под общим наркозом мышам перерезали левый седалищный нерв в средней трети бедра, а затем на центральный отрезок нерва апплицировали раствор, в зависимости от экспериментальной группы животных, содержащий ретроградный флуоресцентный маркер Fluorogold (5%), либо АП (25-35) (10-6 М), либо и то и другое. Через 24 ч после операции поясничный отдел спинного мозга процессировали для морфометрического и иммуногистохимического анализа. В контроле количество Fluorogold-позитивных мотонейронов составило 1223,7162,7 (n = 7), тогда как при аппликации АП (25-35) - 393,285,3 (n = 5, p < 0,01), что говорит о выраженном угнетении ретроградного аксонного транспорта. Окраска поликлональными антителами к каспазе-3 не выявила мотонейронов в состоянии апоптоза, а окраска моноклональными антителами к АП (25-35) была отрицательна как на оперированной, так и на интактной стороне спинного мозга. Таким образом, выявленное нами угнетающее действие АП (25-35) на ретроградный аксонный транспорт не связано с апоптотической гибелью нейронов или накоплением АП (25-35) в теле нейрона, а, вероятно, обеспечивается внутриаксонными эффектами. Полученные данные имеют важное значение для понимания механизмов патогенеза болезни Альцгеймера.