Genes & CellsGenes & CellsГены и КлеткиGenes and Cells2313-18292500-2562Human Stem Cells Institute12162510.23868/gc121625ArticlesСтатьиResearch ArticleEvaluation of the quality and safety of cryopreserved human multipotent mesenchymal stromal cells derived from placenta for the clinical useОценка качества и безопасности применения криоконсервированных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток плаценты в клинической практикеAstrelinaT. AАстрелинаТ. АGomzyakovA. EГомзяковА. ЕKobzevaI. VКобзеваИ. ВKarpovaE. EКарповаЕ. ЭKruglovaA. YКругловаЯ. АScorobogatovaE. VСкоробогатоваЕ. ВBalashovD. NБалашовД. НKnyazevO. VКнязевО. ВYakovlevaM. VЯковлеваМ. ВStem Cell Bank of the Moscow Department of Health, MosowБанк стволовых клеток департамента здравоохранения г. Москвы, МоскваD. Rogachev Federal Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology, MoscowРоссийская детская клиническая больница, МоскваCentral Research Institute of Gastroenterology, MoscowФедеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева, МоскваCentral Research Institute of Gastroenterology, MoscowЦентральный научно-исследовательский институт гастроэнтерологии, Москва1512201384VOL 8, NO4 (2013)ТОМ 8, №4 (2013)828711012023Copyright ©; 2013, Eco-VectorCopyright ©; 2013, Эко-Вектор2013Eco-VectorЭко-Векторhttps://genescells.ru/2313-1829/article/view/121625

The application of multipotent mesenchymal stromal cells (MMSC] in recent years is more widely evaluated in clinical trials. MMSC possess a number of unique features: the ability to support hematopoiesis, facilitating engraftment of HSC; immunomodulatory effects, including in regard to «graft versus host» reaction, and ability to differentiate into various cells types, that is defined their involvement in tissue and organ repair processes. The use of MMSC does not require antigenic compatibility control that leads to high potential accessibility of cell therapy. The most actively MMSC are evaluated in therapy of hematological, immunological, autoimmune, hereditary and other diseases. The aim of the study was to assess the quality and safety of cryopreserved placenta-derived MMSC prepared for clinical application. MMSC were obtained from 90 samples of placenta according to registered medical technology ФС №2010/374 от 13.10.2010. We evaluated the quality of placental MMSC by bacterial and viral control; determined the viability of cells with trypan blue and 7AAD; confirmed the immunophenotype specific for MMSC by flow cytometry. The biological safety of MMSC was analyzed by G-banding technique (15-20 metaphase chromosomes]. 72 samples of placenta-derived MMSC (193 doses] were prepared and used with HSC transplantation to 22 patients (42 MMSC doses] for optimization of HSC engraftment, prevention, control and treatment of «graft versus host» disease, liver regeneration. MMSC transfusion was performed at a dose of 2mln/kg. The results showed that allogeneic placenta-derived MMSC harvested in compliance with strict quality control were safe for clinical use and offered several significant advantages: no special invasive procedure for their tissue source explantation, high proliferative index on the 4th passage of cultivation, which allowed getting the required amount of cells for maximal therapeutic effect.

Применение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) в последние годы все более широко исследуется в клинике. ММСК обладают рядом уникальных особенностей: способность поддерживать ге-мопоэз, облегчая приживление гемопоэтических стволовых клеток (ГСК); иммуномодулирующее действие, в том числе в отношении реакции «трансплантант против хозяина»; способность к дифференцировке в различные типы клеток, что обусловливает участие в процессах репарации тканей и органов. Применение ММСК не требует контроля антигенной совместимости, что предопределяет большую потенциальную доступность для клеточной терапии. Наиболее активно применение ММСК исследуется при терапии гематологических, иммунологических, аутоиммунных, наследственных и других заболеваний. Целью работы явилась оценка качества и безопасности криоконсервированных ММСК плаценты, подготовленных для клинического применения. ММСК получали из 90 образцов плаценты согласно зарегистрированной медицинской технологии ФС № 2010/374 от 13.10.2010. Качество полученных ММСК плаценты оценивали посредством бактериологического и вирусологического контроля; определяли жизнеспособность клеток с помощью окраски трипановым синим и 7AAD; методом проточной цитофлюориметрии подтверждали иммунофенотип, характерный для клеток мезенхимального происхождения. Биологическую безопасность ММСК плаценты оценивали методом кариотипирования метафазныххромосом (15-20 метафаз]. Были заготовлены 72 образца ММСК плаценты (193 дозы] и использованы при трансплантации гемопоэти-ческих стволовых клеток 22 пациентам (42 дозы ММСК плаценты] с целью оптимизации приживления ГСК, профилактики, терапии или контроля реакции «трансплантант против хозяина», обеспечения регенерации печени. Трансфузия ММСК плаценты проводилась в дозе 2 млн/кг. Было показано, что аллогенные ММСК плаценты, заготовленные строго с соблюдением контроля качества, безопасны для клинического применения, а также обладают рядом существенных преимуществ: отсутствие необходимости выполнять специальное инвазивное вмешательство для эксплантации их тканевого источника (плаценты), высокий индекс пролиферации на 4 пассаже культивирования, позволяющий получить необходимое количество клеток для достижения максимального терапевтического эффекта.

multipotent mesenchymal stromal cellsplacentaclinical applicationsafetyqualityмультипотентные мезенхимальные стромальные клеткиплацентаклиническое применениебезопасностькачествоPittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C. et al. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science 1999; 284: 143-7.Bourin P., Sensebe L., Planat-Bechard V. et al. Culture and use of mesenchymal stem cells in phase I and II clinical trials. Stem cells international 2010; 2: 1-8.Battiwalla M., Hematti P. Mesenchymal stem cells in hematopoietic stem cell transplantation. Cytotherapy 2009; 11(5): 503-15.Dominici M., Le Blanc K., Mueller I. et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 2006; 8(4): 315-7.Rebeca S.Y. Wong Mesenchymal stem cells: angels or demons? Journal of biomedicine and biotechnology 2011; 2: 1-9.Le Blanc K., Frassoni F., Ball L. et al. Mesenchymal stem cells for treatment of steroid-resistant, severe, acute graft-versus-host disease: a phase II study. Lancet 2008; 371(9624): 1579-86.Le Blanc K., Rasmusson I., Sundberg B. et al. Treatment of severe acute graft-versus-host disease with third party haploidentical mesenchymal stem cells. Lancet 2004; 363(9419): 1439-41.Lazarus H.M., Koc O.N., Devine S.M. et al. Cotransplantation of HLA-identical sibling culture-expanded mesenchymal stem cells and hematopoietic stem cells in hematologic malignancy patients. Biol Blood Marrow Transplant. 2005; 11(5): 389-98.Kebriaei P., Robinson S. Treatment of graft-versus-host-disease with mesenchymal stromal cells. Cytotherapy 2011; 13(3): 262-8.Aldinucci A., Rizzetto L., Pieri L. et.al. Inhibition of immune synapse by altered dendritic cell actin distribution: a new pathway of mesenchymal stem cell immune regulation. J. Immunol. 2010; 185(9): 5102-10.Григорян А.С. Трансплантация мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток для лечения реакции «трансплантант против хозяина». Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2006; 3 (5): 31-2.Ringden O., Uzunel M., Rasmusson I. et.al. Mesenchymal stem cells for treatment of therapy-resistant graft-versus-host disease. Transplantation 2006; 81(10): 1390-7.Zhu F., Guo G.H., Chen W. et.al. Effect of bone marrow-derived mesenchymal stem cells transplantation on the inflammatory response and lung injury in rabbit with inhalation injury. Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2010; 26(5): 360-5.Петинати Н.А. Профилактика реакции трансплантат против хозяина у больных гемобластозами после трансплантации аллоген-ных гемопоэтических стволовых клеток с помощью мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток донора. [ди^ертация] Москва: Гематологичекий научный центр; 2013 г.Jorgensen C. Mesenchymal stem cells in arthritis: role of bone marrow microenvironment. Arthritis Res. Ther. 2010; 12(4): 135.15.Han Z., Jing Y., Zhang S. et al. The role of immunosuppression of mesenchymal stem cells in tissue repair and tumor growth. Cell & Bioscience 2012; 2: 8.Яковлева М.В., Астрелина Т.А., Осипова Е.Ю. и др. Экспансия ex vivo мезенхимальных стволовых клеток. Медицинская технология от 13.10.2010; ФС №2010/374.Буяновская О.А. Частота анеуплоидии в культурах мезенхимных стволовых клеток человека. [ди^ертация] Москва: Российской академии медицинских наук Медико-генетический научный центр РАМН; 2013 г.