Genes & CellsGenes & CellsГены и КлеткиGenes and Cells2313-18292500-2562Human Stem Cells Institute12157810.23868/gc121578ArticlesСтатьиTromboliticheskaya i fibrinoliticheskaya aktivnost'bakterial'nykh proteazТромболитическая и фибринолитическая активностьбактериальных протеазDanilova,J VДаниловаЮ В

Kazan (Volga region) Federal University, Kazan

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань

Cheremin,A MЧерёминА М

Kazan (Volga region) Federal University, Kazan

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань

Zamaleeva,A IЗамалееваА И

Kazan (Volga region) Federal University, Kazan

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань

Mardanova,A MМардановаА М

Kazan (Volga region) Federal University, Kazan

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань

Zamalutdinova,N MЗамалютдиноваН М

Kazan (Volga region) Federal University, Kazan

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань

SharipovaM RШариповаМ Р

Kazan (Volga region) Federal University, Kazan

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань

Kazan (Volga region) Federal University, KazanКазанский (Приволжский) федеральный университет, Казань1509201273NO3 (2012)№3 (2012)495111012023Copyright ©; 2012, Eco-VectorCopyright ©; 2012, Эко-Вектор2012Eco-VectorЭко-Векторhttps://genescells.ru/2313-1829/article/view/121578

In medical practice is increasingly use proteolytic enzymes of microorganisms. Particular attention of researchers is attracted proteases, which have fibrinolytic properties, and can lyse clots. Previously had been isolated and purified to homogeneity glutamyl endopeptidase, subtilisin-like proteinase and metalloendopeptidase of Bacillus pumilis 3-19, secreted by B. subtilis JB 2036 recombinant strain. The analysis of thrombolytic, fibrinolytic, and anticoagulant properties of the recombinant enzymes was conducted. It is shown that all investigated proteinases are able to efficiently lyse the clot. In an in vitro subtilisin and glutamyl endopeptidase of B.subtilis recombinant strain have anticoagulant activity. Metalloproteinase is not able to influence the process clot formation. Subtilisinlike proteinase and glutamyl endopeptidase possess fibrinolytic activity and the ability of the activator relative to plasminogen. Metalloproteinase shows no fibrinolytic properties. Due to the high incidence of cardiovascular diseases is urgent search for new enzymes with high biological activity, specificity and low toxicity.

В медицинской практике все чаще применяют протеолитические ферменты микроорганизмов. Особое внимание исследователей привлекают протеиназы, обладающие фибринолитическими свойствами, а также способные лизировать тромбы. Ранее были выделены и очищены до гомогенного состояния глутамилэндопептидаза, субтилизиноподобная протеиназа и металлоэндопептидаза Bacillus pumilis 3-19, секретируемые рекомбинантным штаммом B. subtilis JB 2036. Проведен анализ тромболитических, фибринолитических и антикоагулянтных свойств рекомбинантных ферментов. Показано, что все исследуемые протеиназы способны эффективно лизировать тромб. В условиях in vitro субтилизиноподобная протеиназа и глутамилэндопептидаза рекомбинантного штамма B. subtilis обладают антикоагулянтной активностью. Металлопротеиназа же не способна повлиять на процесс тромбинообразования. Субтилизиноподобная протеиназа и глутамилэндопептидаза обладают фибринолитической активностью и активаторной способностью по отношению к плазминогену. Металлопротеиназа не проявляет фибринолитических свойств. В связи с широким распространением сердечнососудистых заболеваний актуальным является поиск новых ферментов с высокой биологической активностью, специфичностью и низкой токсичностью.

glutamyl endopeptidasesubtilisin-like proteinasemetalloproteinasethrombolytic and fibrinolytic propertiesanticoagulant activityглутамилэндопептидазасубтилизи- ноподобная протеиназаметаллопротеиназатромболитические и фибринолитические свойстваантикоагулянтная активностьKudrya V.A., Simonenko I.A. Alkaline serine proteinase and lectin isolation from the culture fluid of Bacillus subtilis. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1994; 41: 505-9.Gupta R., Beg Q.K., Lorenz P. Bacterial alkaline proteases: molecular approaches and industrial applications. Applied Microbiology and Biotechnology 2002; 59: 15-32.Даниличев В.Ф., Кнорринг Г.Ю. Системная энзимотерапия при патологии глаз. Кремлевская медицина. Клинический вестник 2002; 3: 68-70.Шарипова М.Р., Шакиров Е.В., Балабан Н.П. и др. Локали- зация протеолитических ферментов в клетках Bacillus intermedius. Микробиология 2000; 69(5): 660-7.Sharipova M.R., Shagimardanova E.I., Chastukhina I.B. et al. The expression of Bacillus intermedius glutamyl endopeptidase gene in Bacillus subtilis recombinant strains. Mol. Biol. Rep. 2007; 34: 79-87.Balaban N.P., Kayumov A.R., Kirillova Yu. et al. The expression of the serine proteinase gene of Bacillus intermedius in Bacillus subtilis. Microbiological Research 2008; 163: 39-50.Сабирова А.Р. Структура гена новой металлопротеиназы Bacillus intermedius и регуляция его экспрессии [диссертация]. Ка- зань: Казанский (Приволжский) федеральный ун-т; 2011.Михайлова Е.О. Субтилизинподобная протеиназа Bacillus intermedius, секретируемая рекомбинантным штаммом Bacillus subtilis на разных фазах роста [диссертация]. Казань: Казанский (Приволжский) федеральный ун-т; 2007Шамсутдинов Т.Р. Глутамилэндопептидаза Bacillus intermedius, секретируемая рекомбинантным штаммом Bacillus subtilis на разных фазах роста [диссертация]. Казань: Казанский (Приволжский) федеральный ун-т; 2009.Рудакова Н.Л. Новая секретируемая металлоэндопептидаза Bacillus intermedius [диссертация Казань: Казанский (Приволжский) федеральный ун-т; 2010.Astrup T., Mullertz S.T. The fibrin plate method for estimating fiblinolytic aktiviti. Arch. Biochem.Biophys. 1952; 40: 346-51.Маликова Л.А., Марданова А.М., Соколова О.В. и др. Осо- бенности биосинтеза внеклеточных субтилизиноподобных протеи- наз, секретируемых Bacillus pumilis КММ 62. Ученые записки КГУ 2006; 148(2): 90-101.Лютова Л.В., Андреенко Г.В., Карабасова М.А. и др. Ис- следование тромболитических и фибринолитических свойств ти- олзависимой сериновой протеиназы (ТСП) из Thermoactinomyces vulgaris in vivo. Прикл. биохим. и микробиол. 1990; 26(5): 623-8.Ицкович Е.Л., Знаменская Л.В., Балабан Н.П. и др. Био- синтез щелочной внеклеточной протеиназы Bacillus intermedius. Микробиология 1995; 64(5): 623-9.