Stem cell therapy may provide effective and patogenetically proved treatment of chronic kidney disease caused by interstitial fibrosis after tubule damage. It was reported that transplanted bone marrow stem cells participate in tubule regeneration [1]. At the same time the potential of hematopoietic stem cells in tubule regeneration is not well investigated. The purpose of the study was to evaluate the participation of human cord blood stem cells in rat kidney tubule regeneration after unilateral ureteral obstruction. 18 laboratory rats were subjected to left unilateral ureteral obstruction (UUO). 3x106 of human cord blood mononuclears (n = 9) or equivalent volume of saline (n = 9) were injected into rat's tail vein. Kidney tissue was collected at the end of the 3, 6 or 14 day after operation. Paraffin-embedded slices were stained with mononuclear antibodies against C-kit (stem and progenitor cell marker), proliferating cell nuclear antigen for the cells proliferative capacity evaluation (PCNA) and а-smooth muscle actin (a-SMA) for myofibroblasts detection. Number of proliferating cells in tubuli ad interstitium was considerably larger in the obstructed kidney of the transplantation group, as well as the number of proliferating cells in the glomeruli at 14 day after operation. At the same time number of a-SMA-positive cells in the transplanted group was significantly lower compared with sham-transplanted group. There were no differences in expression of these markers in the contralateral kidneys. UUO had no impact on C-kit expression in kidney tissue. Thus, transplantation of human cord blood mononuclear cells in UUO stimulates proliferative activity of tubular cells and interstitium, reduces myofibroblast activation and risk of kidney fibrosis
Клеточная терапия с использованием стволовых клеток может стать эффективным и патогенетически обоснованным методом лечения хронической болезни почек (ХБП) при развитии интерстициального фиброза, который является следствием повреждения канальцевого аппарата почки. Ранее было показано, что трансплантированные стволовые клетки костного мозга участвуют в восстановлении клеток канальцев [1]. В то же время потенциал гемопоэтических стволовых клеток в регенерации канальцевого аппарата почки не изучен. Целью исследования стало изучение участия мононуклеаров пуповинной крови человека в регенерации канальцевого аппарата почки крысы на модели унилатеральной обструкции мочеточника. 18 лабораторным крысам проводили унилатеральную обструкцию мочеточника слева. Экспериментальной группе (n = 9) сразу после операции вводили по 3х106 монону-клеаров пуповинной крови человека в хвостовую вену, контрольной группе (n = 9) - эквивалентный объём 0,9% NaCl. Эксплантацию органов производили через 3, 6, 14 сут. после операции. Парафиновые срезы почки окрашивали иммуногистохимически с антителами к C-kit (маркёру стволовых и прогениторных клеток), ядерному антигену пролиферирующих клеток (PCNA) для оценки их пролиферативной активности и а-гладкомышечному актину (a-SMA) для выявления миофибробластов. Сравнительный анализ оперированных почек экспериментальной и контрольной групп крыс показал, что на всех сроках в первой группе количество пролиферирующих клеток в канальцах и интерстиции было выше, чем в почках животных контрольной группы. К 14 сут. значительно возросло количество пролиферирующих клеток в клубочках почек после обструкции в экспериментальной группе. В то же время, на всех исследованных сроках количество a-SMA'-клеток в первой группе было значительно ниже, по сравнению с контрольной. В контралатеральных почках статистически значимых различий в экспрессии PCNA и a-SMA не было выявлено. Экспрессия C-kit в оперированных почках не отличалась от таковой в контралатеральных, а также в почках здоровых животных. Таким образом, введение мононуклеаров пуповинной крови человека при унилатеральной обструкции мочеточника стимулирует пролиферативную активность клеток клубочков, канальцев и интерстиция, уменьшая активацию миофибро-бластов и риск развития фиброза почки.