Genes & CellsGenes & CellsГены и КлеткиGenes and Cells2313-18292500-2562Human Stem Cells Institute12046710.23868/gc120467ArticlesСтатьиResearch ArticleInvestigating the properties of membrane vesicles obtained from human cells HEK293 using cytochalasin BИССЛЕДОВАНИЕ СВОЙСТВ МЕМБРАННЫХ ВЕЗИКУЛ, ПОЛУЧЕННЫХ С ПОМОЩЬЮ ЦИТОХАЛАЗИНА В ИЗ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА НЕК293GomzikovaM. OГомзиковаМ. О

Kazan (Volga Region) Federal University

RizvanovA. AРизвановА. А

Kazan (Volga Region) Federal University

Albert.Rizvanov@kpfu.ruКазанский (Приволжский) федеральный университет15092015103VOL 10, NO3 (2015)ТОМ 10, №3 (2015)273205012023Copyright ©; 2015, Eco-VectorCopyright ©; 2015, Эко-Вектор2015Eco-VectorЭко-Векторhttps://genescells.ru/2313-1829/article/view/120467

The preparation method of membrane vesicles from human cells using cytochalasin B allows to overcome the limitations of human cells natural microvesicles, associated with the complex procedure of isolation and limited output. Membrane vesicles (MV) prepared from human cells are a promising vector for delivering of various bioactive substances. We performed the preparation of MV from human cells HEK293 using cytochalasin B and size determination of the MV. Then we studied the influence of applied MV concentration and intravesicular substance concentration on the substance delivery effectiveness to recipient cells. It was found that MV ranging in size from 164.2 nm to 3580 nm, but the most of MV sized from 164.2 nm to 712,4 nm (84. 6%). MV are able to enclose the cytoplasmic contents of the parent cells and deliver it to recipient cells, the amount of delivered substance (CFDA SE) to the recipient cells is proportional to the loaded substances into MV

Получение мембранных везикул из клеток человека с помощью цитохалазина В позволяет преодолеть ограничения естественных микровезикул клеток человека, связанные со сложной процедурой выделения и ограниченным выходом. Мембранные везикулы (МВ), полученные из клеток человека, являются перспективным вектором для доставки различных биологически активных веществ. Нами проведено получение МВ из клеток человека НЕК293 с помощью цитохалазина В, исследование размера МВ, а также оценка влияния концентрации наносимых МВ и концентрации загруженного в МВ вещества на эффективность доставки в клетки-реципиенты. Было установлено, что размер МВ варьирует от 164,2 нм до 3580 нм, с пиком в области от 164,2 нм до 712,4 нм. МВ способны заключать внутри себя цитоплазматическое содержимое исходной клетки и переносить заключенные молекулы клеткам-реципиентам, при этом количество доставляемого в клетку-реципиента вещества (CFDA SE) пропорционально загрузке вещества в МВ

microvesiclesmembrane vesiclescytochalasin Bмикровезикулымембранные везикулыцитохалазин ВKawabata K., Takakura Y., Hashida M. The fate of plasmid DNA after intravenous injection in mice: involvement of scavenger receptors in its hepatic uptake. Pharm. Res. 1995; 12(VI): 825-30.Nayerossadat N., Maedeh T., Ali P.A. Viral and nonviral delivery systems for gene delivery. Adv. Biomed. Res. 2012; 1: 27.Seow Y., Wood M. J. Biological gene delivery vehicles: beyond viral vectors. Mol. Ther. 2009; 17tV): 767-77.Wu H., Oliver A.E., Ngassam V.N. et al. Preparation, characterization, and surface immobilization of native vesicles obtained by mechanical extrusion of mammalian cells. Integr. Biol. tCamb). 2012; 4(VI): 685-92.Semple S. C., Troy O. H., Kathy A. C. et al. Immunogenicity and rapid blood clearance of liposomes containing polyethylene glycol-lipid conjugates and nucleic Acid. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005; 312tIII): 1020-6.Byun H. M., Suh D., Yoon H., et al. Erythrocyte ghost-mediated gene delivery for prolonged and blood-targeted expression. Gene. Ther. 2004; 11(V): 492-6.Гомзикова М.О., Гайфуллина Р.Ф., Мустафин И.Г. и др. Мембранные микровезикулы: биологические свойства и участие в патогенезе заболеваний. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2013; 8(1): 6-11.Biancone L., Bruno S., Deregibus M. C. et al. Therapeutic potential of mesenchymal stem cell-derived microvesicles Nephrol Dial Transplant. 2012; 27(VIII): 3037-42.Pick H., Schmid E. L., Tairi A. P. et al. Investigating cellular signaling reactions in single attoliter vesicles J Am Chem Soc 2005; 127(IX): 2908-12.Phillips M.J., Oda M., Yousef I. M. et al. Effects of cytochalasin B on membrane-associated microfilaments in a cell-free system J Cell. Biol. 1981; 91(2): 524-30.MacLean-Fletcher S., Pollard T.D. Mechanism of action of cytochalasin B on actin. Cell. 1980; 20(II): 329-41.Wendel H., Dancker P., Kinetics of actin depolymerization: influence of ions, temperature, age of F-actin, cytochalasin B and phalloidin. Biochim. Biophys. Acta. 1986; 873(III): 387-96.Mao Z., Cartier R., Hohl A. et al. Cells as factories for humanized encapsulation. Nano Lett. 2011; 11(V): 2152-6.Zhang B., Shan H., Li D. et al. Different methods of detaching adherent cells significantly affect the detection of TRAIL receptors. Tumori. 2012; 98(VI): 800-3.Carter S.B. Effects of cytochalasins on mammalian cells Nature. 1967; 213(5073): 261-4.Mulcahy L.A., Pink R.C., Carter D.R. Routes and mechanisms of extracellular vesicle uptake. J. Extracell. Vesicles. 2014; 3.