Metabolicheskiy imidzhing pecheni v protsesse regeneratsii

Abstract

Full Text

Печень здоровых субъектов обладает высоким восстановительным потенциалом, однако при острой травме или фоновых заболеваниях данный потенциал значительно снижается. В связи с этим, важной задачей является оценка восстановительного потенциала печени с целью прогнозирования осложнений после резекционных вмешательств. Стандартные методы оценки структурно-функционального состояния печени (морфологический анализ, КТ, МРТ, УЗИ) не позволяют изучать процессы, происходящие в клетках печени в динамике в процессе регенерации. Современные методы мультифотонной микроскопии в сочетании с FLIM (fluorescent lifetime imaging) расширяют возможности исследования структуры и метаболической активности клеток печени, благодаря своей неинвазивности, высокой чувствительности и отсутствию необходимости введения экзогенных красителей. Эксперименты проводили на крысах линии Wistar массой 400-500 г. Удаление левой доли печени - модель 30% гепатэктомии (30% ГЭ), удаление левой и медиальной долей печени - модель 70% гепатэкто-мии (70% ГЭ). Метаболический имиджинг проводили на 3 и 7 сутки после резекции. Для прицельного анализа метаболических процессов в гепатоцитах были получены значения окислительно-восстановительного отношения (ФАД/НАД(Ф)Н), а также времена жизни флуоресценции и их вклады свободной и связанной с белком формы НАД(Ф)Н и открытой и закрытой формы ФАД. Для оценки общей синтетической активности в клетках печени был представлен раздельный анализ НАДН и НАДФН. Исследование липидного состава ткани печени при регенерации проводили на крио-срезах методом масс-спектрометрии вторичных ионов ToF-SIMS 5 (ION-TOF, Германия). Образцы резецируемой печени исследовали в качестве контроля. Результаты проведенного анализа показали усиление общей метаболической активности гепатоцитов с увеличением вклада процессов окислительного фос-форилирования в гепатоцитах, что может указывать на увеличение энергетических потребностей пролиферирующих клеток. Полученные параметры могут быть полезны в определении критериев восстановительного потенциала печени после операционных вмешательств.