Razrabotka elastinovykh bar'ernykh membran dlya napravlennoy regeneratsii tkaney otsenka stepeni biosovmestimosti in vitro

Abstract

Full Text

Использование барьерных мембран (БМ) для направленной регенерации тканей в стоматологии и челюстно-лицевой хирургии является доминирующим. Однако данный тип материалов до сих пор неспособен обеспечить все необходимые условия для полноценного восстановления дефектов, в связи с чем некоторые процедуры, такие как, например, аугментация десневого лоскута, до сих пор трудноосуществимы. Одним из возможных вариантов решения данной проблемы может стать разработка биоактивных БМ на основе эластинового внеклеточного матрикса. Целью данной работы стало исследование и сравнение эффективности двух различных методов выделения эластина из ксеногенной аорты с целью их дальнейшей оптимизации для изготовления эластиновых БМ. Для этого были отобраны методы, которые позволяют выделить эластиновый компонент внеклеточного матрикса, при условии максимального сохранения структуры эла-стиновых фибрилл. На основе полученных материалов были сформированы 2 экспериментальные группы: материалы, обработанные цианогенбромидом (Lu Q. et al, Biomaterials. 2004), далее группа ЦГБр; и с помощью автоклавирования - группа АВТ (Lillie M.A. et al, Connect Tissue Res. 1998). Для определения эффективности отобранных методов было проведено in vitro исследование цитотоксичности, а также измерение остаточного ДНК донора в полученных материалах. Анализ эффективности удаления ДНК показал, что обработка автоклавированием приводит к удалению 69±11% ДНК донора. Однако среднее значение ДНК в данных материалах все еще превышало максимально допустимое значение в 50 нг/мг ткани. Обработка цианогенбромидом показала большую эффективность: количество ДНК донора в ткани после обработки составляло 10,6±2,2 нг/ мг ткани. Однако in vitro исследование цитотоксичности показало, что материалы группы ЦГБр токсичны для клеток, так как процент погибших клеток на четвертые сутки инкубации составил 74±6% относительно контроля. В то время как в группе АВТ цитотоксический эффект не наблюдался: выживаемость клеток составила 87±4%. Полученные результаты говорят о том, что обработка цианогенбромидом не подходит для получения эластино-вых БМ, поскольку оказывает цитотоксический эффект на клетки. Обработка актоклавированием является более оптимальной, однако требует дополнительной модификации, поскольку недостаточно хорошо удаляет ДНК из донорской ткани.