EXPRESSION, PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF NOVEL ANTISTASIN-LIKE PROTEINS FROM THE MEDICINAL LEECH

V. N Lavrenova; Лавренова В. Н; E. N Grafskaia; Графская Е. Н; D. M Shirokov; Широков Д. А; P. A Bobrovsky; Бобровский П. А; A. M Belova; Белова А. М; I. A Latsis; Лацис И. А; V. Y Varlamova; Варламова В. Ю; M. A Dmitrieva; Дмитриева М. А; V. V Babenko; Бабенко В. В; V. A Manuvera; Манувера В. А; V. N Lazarev; Лазарев В. Н

doi:10.23868/gc122660

EXPRESSION, PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF NOVEL ANTISTASIN-LIKE PROTEINS FROM THE MEDICINAL LEECH

Authors: Lavrenova V.N¹^,2, Grafskaia E.N¹^,3, Shirokov D.M¹^,4, Bobrovsky P.A¹, Belova A.M¹, Latsis I.A¹, Varlamova V.Y¹^,2, Dmitrieva M.A¹^,4, Babenko V.V¹, Manuvera V.A¹^,3, Lazarev V.N¹^,3
Affiliations:
1. Federal Research Clinical Center of Physical-Chemical Medicine, Federal Medical and Biological Agency of Russia
2. Lomonosov Moscow State University
3. Moscow Institute of Physics and Technology
4. K.I. Skryabin Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology
Issue: Vol 15, No 3S (2020)
Pages: 56-57
Section: Articles
Submitted: 17.01.2023
Published: 15.12.2020
URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/122660
DOI: https://doi.org/10.23868/gc122660
ID: 122660

Cite item

Full Text

Abstract
Full Text
About the authors
References
Supplementary files
Statistics

Abstract

Full Text

Антистазины - белки, секретируемые слюнными железами медицинской пиявки для ингибирования системы свёртывания крови человека и других позвоночных животных. Антикоагулянтная активность белков, производимых медицинской пиявкой, уже много лет привлекает внимание учёных и фармакологов, так как является перспективным подходом к терапии тромбозов, тромбофлебитов, постинфарктных и постинсультных состояний, а также некоторых других заболеваний. Однако, традиционная антикоагулянтная терапия зачастую приводит к ряду побочных эффектов, что делает поиск новых антикоагулянтов очень актуальной задачей. Ранее в нашей лаборатории был отсеквенирован геном и транскриптом медицинской пиявки, по результатам биоинформатического анализа которых были выявлены последовательности 1 4 антистазин-подобных белков, обладающих потенциальными антикоагулянтны-ми свойствами. Были сконструированы: • векторы на основе плазмиды pET22b для экспрессии в кишечной палочке • белков, слитых с полигистидиновой последовательностью, • белков, слитых также с последовательностью домена белка SlyD E.coli; • векторы на основе pcDNA™3.4 TOPO™ для экспрессии в Expi293 • белков, слитых с полигистидиновой последовательностью, • белков, слитых также с последовательностью лёгкой цепи иммуноглобулина G. Для получения очищенных целевых белков проводили металл-афинную хроматографию и обработку TEV-протеиназой с последующей ионообменной хроматографией. Антикоагулянтную активность анализировали по показателям активированного частичного тромбопла-стинового времени и тромбинового времени. Отобранные по данным тестам белки могут быть перспективными кандидатами для разработки фармацевтических препаратов.

References

Supplementary files

Supplementary Files

Action

1. JATS XML

Download

Username
Password
Remember me

Forgot password?	Register

Username
Password
Remember me

Forgot password?	Register

EXPRESSION, PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF NOVEL ANTISTASIN-LIKE PROTEINS FROM THE MEDICINAL LEECH

Full Text

Abstract

Full Text

About the authors

References

Supplementary files