Geterogennost' subpopulyatsiy odinochnykh opukholevykh stvolovykh kletok v tkani raka molochnoy zhelezy i svyaz' s limfogennym metastazirovaniem

Abstract

Full Text

АКТУАЛЬНОСТЬ. Опухолевые стволовые клетки (ОСК) являются субпопуляцией, наделенной опухоль-инициирующими свойствами. Однако и им присуща гетерогенность, в силу чего на сегодняшний день не существует универсального маркера стволовости, и нет четкой связи с их ролью в развитии метастазов, в том числе и при РМЖ (YangF. et al., 2016). Некоторые маркеры, такие как CD133, CD166, CD44, CD24 и активность ALDH1, показали свою состоятельность для идентификации ОСК во многих солидных опухолях (MedemaJP., 2013). Однако экспрессия данных маркеров ОСК не является однородной между типами опухолей. При исследовании стволовых клеток при РМЖ обычно не обращается внимание на локализацию в различных по величине и форме многоклеточных структурах опухоли или их наличие как одиночных клеток. Между тем, одиночные опухолевые клетки, по-видимому, с большей вероятностью могут осуществлять интравазацию и становиться «семенами» для метастазирования. В настоящем исследовании изучена экспрессия одиночными опухолевыми клетками рака молочной железы маркеров стволовости CD133 и CD44/CD24, а также оценена связь с наличием лимфогенных метастазов. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. В исследование было включено 56 больных инвазивной карциномой молочной железы неспецифического типа. Средний возраст пациентов составил 51,67 ±8,46. По молекулярно-генетическому типу опухоли распределились следующим образом: люминальный В - 42%, трижды негативный - 38%, Her2-позитивный - 20%. Образцы фиксированного опухолевого материала были окрашены антителами против CD44 (v6 cloneVFF7, Novocastra, Leica, Германия), CD24-PE (NovusBio, США), CD133 (clone 3F10, 1:800, MyBioSource, USA) и CK7 (cloneN-20, SantaCruze, USA) и проанализированы с помощью конфокального микроскопа LSM780 (CarlZeiss, Germany). Результаты. Для РМЖ описано наличие пяти типов структур, формируемых опухолевыми клетками. Среди них выделяют одиночные опухолевые клетки (Завьялова М.В. и др., 2006). В результате проведенного исследования было показано, что одиночные CD44 + CD24- клетки в опухоли присутствуют в 32% случаев. Количество CD44+CD24- клеток среди одиночных опухолевых клеток было достоверно ниже (p = 0,0001) по сравнению с многоклеточными структурами опухоли (от 11 до 9%) и равнялось 1%. В свою очередь частота встречаемости CD133+ одиночных опухолевых клеток равнялась 70%, а их количество - 5,45(0,56-16,70)%. Было показано, что в группе больных с наличием лимфогенных метастазов количество CD133 + одиночных опухолевых клеток достоверно ниже (р = 0,043), при этом количество CD44+CD24- клеток не различалось (р = 0,27). Что касается связи стволовых клеток многоклеточных структур с лимфогенным метастазированием, то ранее (Денисов Е.В. и др., 2017) нами было показано, что количество CD44+CD24- клеток в разных многоклеточных структурах РМЖ одинаковое. ВЫВОДЫ. Количество одиночных опухолевых стволовых клеток, оцениваемое с помощью маркеров CD133 и CD44/CD24, различается. С лимфогенным метастазированием связаны CD133+ одиночные опухолевые клетки.