BIOLOGIChESKIE EFFEKTY TROMBOTsITARNOGO LIZATA PRI DOBAVLENII V SREDU KUL'TIVIROVANIYa KLETOK ChELOVEKA

Cover Page


Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription or Fee Access

Abstract

Лизат тромбоцитов (ЛТ) человека, содержащий ряд биологически активных веществ, позиционируется как возможная замена фетальной телячьей сыворотки (ФТС) при культивировании клеток, предназначенных для клеточной терапии и регенеративной медицины. Ранее нами были установлены принципиальные различия в биохимическом составе ЛТ и ЭТС. В данной работе показано, что концентрации эстрадиола, тестостерона и инсулина в ЛТ в несколько раз выше, чем в ЭТС. Уровни тромбоцитарного фактора роста (PDGF AA, AB), трансформирующего фактора роста-р1 и сосудистого эндотелиального фактора роста в ЛТ в 10-50 раз выше, чем в ЭТС; PDGF BB в ЛТ не выявлен, а концентрации инсулиноподобного фактора роста-1 в ЛТ и ЭТС сходны. ЛТ поддерживает in vitro пролиферацию иммортализованных фибробластов кожи человека (ФЧ), мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) жировой ткани человека и эпидермоидной карциномы гортани НЕр-2. Время удвоения культур ФЧ и ММСК в присутствии ЛТ (10%) по сравнению с ЭТС (10%) снижается в 1,5-2,0 раза. ЛТ в отличие от ЭТС не поддерживает пролиферацию 3 из 4 культур человеческих опухолевых клеток: аденокарциномы молочной железы MCF-7, карциномы легкого линий А-549 и АОТ-75. ЛТ, как и ЭТС, не препятствует индукции остеогенной и адипогенной диф-ференцировки ММСК in vitro, сохраняя, таким образом, их пластичность. После термоинактивации (56°С, 1 ч) способность стимулировать пролиферацию у ЛТ исчезает, а у ЭТС - сохраняется. Обсуждаются возможные причины различий в эффектах ЛТ и ЭТС как ростовых добавок к среде культивирования.

About the authors

N. S Sergeeva

N.I. Pirogov Russian Research Medical University, Moscow, Russia; P.A. Herzen Moscow Research Oncological Institute, Moscow, Russia

Y. D Shanskiy

P.A. Herzen Moscow Research Oncological Institute, Moscow, Russia

I. K Sviridova

P.A. Herzen Moscow Research Oncological Institute, Moscow, Russia

V. A Kirsanova

P.A. Herzen Moscow Research Oncological Institute, Moscow, Russia

S. A Ahmedova

P.A. Herzen Moscow Research Oncological Institute, Moscow, Russia

E. A Kuvshinova

P.A. Herzen Moscow Research Oncological Institute, Moscow, Russia

I. S Meisner

N.I. Pirogov Russian Research Medical University, Moscow, Russia

References

  1. Marx R. Plateler-rich plasma: evidence to support its use. J. Oral Maxillofac. Surg. 2004; 62(4): 489-96.
  2. Rauch C., Feifel E., Amann E.-M et al. Alternatives to the use of fetal bovine serum: human platelet lysate as a serum substitute in cell culture media. ALTEX 2011; (25): 305-16.
  3. Mojica-Henshaw M.P., Jacobson P., Morris J. et al. Serum-converted platelet lysate can substitute for fetal bovine serum in human mesenchymal stromal cell cultures. Cytotherapy 2013; 15: 1458-68.
  4. Azouna N.B., Jenhani F., Regaya Z. et al. Phenotypical and functional characteristics of mesenchymal stem cells from bone marrow: comparison of culture using different media supplemented with human platelet lysate or fetal bovine serum. Stem Cell Res. Ther. 2012; (3): 6.
  5. Lange C., Cakiroglu F., Spiess A.-N. et al. Accelerated and safe expansion of human mesenchymal stromal cells in animal serum-free medium for transplantation and regenerative medicine. J. Cell. Phys. 2007; 213: 18-26.
  6. Sankaranarayanan K., Renny C.M., Raghavan U. et al. Humanised substitutes for animal sera in human mesenchymal stem cell culture and differentiation. Cell Biol. 2011 Apr. 15. Epub ahead of print.
  7. Crespo-Diaz R., Behfar A., Butler G.W. et al. Platelet lysate consisting of a natural repair proteome supports human mesenchymal stem cell proliferation and chromosomal stability. Cell Transpl. 2011; (20): 797-811.
  8. Pazos P., Boveri M., Gennari A. et al. Culturing cells without serum: lessons learnt using molecules of plant origin. ALTEX 2004; (21): 67-72.
  9. Filipic B., Shehata M., Toth S. et al. Novel serum replacement based on bovine ocular fluid: a useful tool for cultivation of different animal cells in vitro. ALTEX 2002; (19): 15-20.
  10. Naaijkens B.A., Niessen H.W., Prins H.-J. et al. Human platelet lysate as a fetal bovine serum substitute improves human adipose-derived stromal cell culture for future cardiac repair applications. Cell Tiss. Res. 2012; 348(1): 119-30.
  11. Killian O., Flesch I., Wenisch S. et al. Effects of platelet growth factors on human mesenchymal stem cells and human endothelial cells in vitro. Eur. J. Med. Res. 2004; (9): 337-44.
  12. El Backly R., Ulivi V., Tonachini L. et al. Platelet lysate induces in vitro wound healing of human keratynocytes associated with a strong proinflammatory response. Tissue Eng. Part A. 2011; 17(13-14): 1787-800.
  13. Peterson J.E., Zurakowski D., Italiano J.E. et al. VEGF, PF4, and PDGF are elevated in platelets of colorectal cancer patients. Angiogenesis 2012; (15): 265-73.
  14. Mishra A., Tummala P., King A. et al. Buffered platelet-rich plasma enchances mesenchymal stem cell proliferation and chondrogenic differentiation. Tissue Eng. C. 2009; 15(3): 431-5.
  15. Шанский Я. Д., Сергеева Н.С., Свиридова И.К. и др. Исследование лизата тромбоцитов человека как перспективной ростовой добавки для культивирования стволовых и других типов клеток. Клеточные технологии в биологии и медицине 2013; (3): 153-8.
  16. Сергеева Н.С., Васильев А.В., Шанский Я.Д. и др. Некоторые биологические характеристики и эффекты лизата тромбоцитов доноров как ростовой добавки для безопасного культивирования клеток. В: Сборник тезисов докладов V Всероссийской научнопрактической конференции «Стволовые клетки и регенеративная медицина»; 18-21 ноября 2013 г., Москва, Россия. Москва: МАКС Пресс. 2013; С. 68.
  17. Bernardo M.E., Avanzini A., Perotti C. et al. Optimization of in vitro expansion of human multipotent mesenchymal stromal cells for cell-therapy approaches: further insights in the search for a fetal calf serum substitute. J. Cell. Phys. 2006; 211: 121-30.
  18. Технический регламент о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии. Приложение к постановлению Правительства РФ от 26.01.2010 № 29.
  19. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотникая Р.П. и др. В: В.В. Меньшиков, редактор. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987; 368 с.
  20. Сергеева Н.С., Свиридова И.К., Кирсанова В.А. и др. Культивирование и характеристика негемопоэтических стволовых клеток из жировой ткани человека. Молекулярная медицина 2006; (2): 23-9.
  21. Mossman T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. 1983; 65: 55-63.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2014 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: 

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies