Поиск Кабинет

Влияние модифицированного глиального нейротрофического фактора (GDNF) на регенерацию эпителиально-стромального дефекта роговицы в эксперименте

Гены & Клетки: Том XI, №3, 2016 год, стр.: 54-62

 

Авторы

Н.А. Гаврилова, А.В. Ревищин, С.А. Борзенок, О.Ю. Комова, М.Б. Агаммедов, Х.Д. Тонаева, Д.С. Островский, Г.В. Павлова

ДЛЯ ТОГО ЧТОБЫ СКАЧАТЬ СТАТЬЮ В ФОРМАТЕ PDF ВАМ НЕОБХОДИМО АВТОРИЗОВАТЬСЯ, ЛИБО ЗАРЕГИСТРИРОВАТЬСЯ

Цель работы – изучить влияние модифицированного глиального нейротрофического фактора (GDNF) на процесс заживления эпителиального и эпителиально-стромального повреждений роговицы в эксперименте на мышах линии C57BL/6J. После эпителиального и эпителиально-стромального повреждений производили инстилляции кондиционированной среды, полученной в результате культивирования клеток HEK293, содержащих конструкцию c геном GDNF без пре- и пропоследовательностей. Контролем служила среда, конди- ционированная нетрансфицированными клетками. Оценивали площадь эпителиального дефекта роговицы и частоту формирования эрозий роговицы, развивающихся на фоне эпителиального дефекта. Для иммуногистохимического исследования роговицы после эпителиально-стромального повреждения использовали антитела к цитокератину 5/18, с-Мet, коллагену IV типа, фосфо-ERK1/2, фосфо-JNK1/2,Ki67, Bcl2, GAP43, ТIМР-1, TGF-β, Bax и ММР9. Площадь эпителиального дефекта роговицы глаз животных экспериментальной группы в разные периоды времени в течение суток после деэпителизации была меньше, чем в контроле. Частота формирования эрозий роговицы в экс периментальной группе после деэпителизации наблюдалась в 30–35%, в контроле – в 80–85% случаев. Иммуногисто химическое исследование роговицы после эпителиально- стромального повреждения показало, что GDNF стимулировал пролиферативную активность эпителиальных клеток и кератоцитов, способствовал активной эпителиальной миграции и адгезии эпителиальных клеток, оказывал антиапоптотический и антифибротический эффекты, принимал активное участие в формировании стромального нервного сплетения.

Полученные результаты свидетельствуют об эффективности применения модифицированного GDNF при повреждениях роговицы и необходимости проведения дальнейших исследований с целью разработки и тестирования методов терапевтического использования препаратов на основе данного нейротрофического фактора.

Ключевые слова: повреждение роговицы, глиальный нейротрофический фактор.

Objective is to study the effect of modified glial-derived neurotrophic factor (GDNF) on healing of epithelial and epithelial-stromal corneal lesions in mice C57BL / 6J. After corneal damage the instillations of supernatant conditioned by HEK293 cells expressed GDNF gene construction without pre- and pro- sequences were produced. For control, a medium conditioned by not transfected cells was used. We assessed the area of corneal epithelial defect and corneal erosion rate, developing after the epithelial defect. The immunohistochemical study using antibodies against cytokeratin 5/18, c-Met, collagen IV, phospho-ERK1/2, phospho-JNK1/2, Ki67, Bcl2, GAP43, TIMR-1, TGF-β, Bax, and MMP 9 was performed.

The area of corneal epithelial defect in the eyes of experimental animals within one day after damage was smaller than in the control. Frequencies of corneal erosions formed in the eyes of experimental animals after damage was observed in 30-35% and 80-85% of cases in the experimental and control groups, respectively. Immunohistochemical studies using these antibodies showed that GDNF stimulated the proliferative activity of epithelial cells and keratinocytes, contributed to active migration and adhesion of epithelial cells, had anti-apoptotic and antifibrotic effects, took an active part in the formation of stromal nerve plexus. The results indicate the hopefulness of therapeutic application of the modified GDNF after corneal injury and the need for further research to develop and test methods for the therapeutic use of drugs on the basis of this neurotrophic factor.

Keywords: corneal lesion, glial-derived neurotrophic factor.

Подняться вверх сайта